兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽  檢測試劑盒   elisa原理

產(chǎn)品名稱：兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽ELISA試劑盒

英文名稱：rabbit intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA KIT

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。

1.棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制）,，37℃,60分鐘,。
2.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，200μl/每孔,，甩干。
3.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液）100μl,，37℃,，60分鐘。
4.溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔,，甩干,。
5.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）,。
6.依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
7.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測,。

實(shí)驗(yàn)備注：
1.用戶在初次使用試劑盒時(shí),，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底,。
2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及終止液,。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零,。
3.為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存,。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液,。
5.建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽

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