兔糖化血紅蛋白A1c  elisa實驗  elisa原理

產品名稱：兔糖化血紅蛋白A1cELISA試劑盒

英文名稱：Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA KIT

試驗原理：
    IL-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測,。先將IL-1和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后，加入親和素標記過的HRP,。再經過溫育和洗滌,，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A,、B,，和酶結合物同時作用。產生顏色,。顏色的深淺和樣品中IL-1的濃度呈比例關系,。
操作步驟：
1．使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差,。
2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔,。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6．甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應立即測定結果,。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果 判 斷 與 分 析：
1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IL-1標準品濃度為橫坐標（X）,，做得相應的曲線,，樣品的IL-1含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3,、檢測值范圍：0-800pg/ml
4,、敏感度： 1.0 pg/ml

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