詳細(xì)介紹
ELISA試劑盒?。牛蹋桑樱翙z測試劑盒 ELISA?。耍桑?/p>
產(chǎn)品名稱:大鼠胎盤生長因子
英文名稱:Rat placenta growth factor,PLGF ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD RB?。桑拢?br />保存條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
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洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗,。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),,以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來,??梢哉f在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),,應(yīng)引起操作者的高度重視,,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,不得馬虎,。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,過程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),;c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,,放置1-2分鐘,,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短,;d.吸干孔內(nèi)液體,。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干,;e.重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定),。在間接法中如本底較高,,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時(shí)間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法,。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液,。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),,也含親水基團(tuán),,其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體,。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時(shí),,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度,。
(2)流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水,。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續(xù)沖洗2分鐘后,,吸干液體,,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可,。浸泡式猶如盆浴,,流水沖洗式則好比淋浴,,其洗滌效果更為*,且也簡便,、快速,。已有實(shí)驗(yàn)表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌,。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,,讓水流沖擊板孔表面,,洗滌效果更佳,。
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