詳細介紹
產(chǎn)品名稱:大鼠維生素D2
英文名稱:Rat Vitamin D2,VD2 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
檢測范圍:詳見說明書
主要作用:科研
待檢樣本:體液,血清,,血漿,,細胞培養(yǎng)上清液,尿液,,組織勻漿,心房水標本等等。
檢測目標:人,,小鼠,,大鼠,豚鼠,,豬,,犬,兔,,牛,,羊,猴,,兔,,馬等動物種屬。
大鼠維生素D2 結果判斷
定性測定
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,,分別用"陽性",、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應,。"陰性"則為無反應,。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,,其實質(zhì)仍是一個定性試驗,。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,,呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度,。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性,、弱陽性更具定量意義,。 在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔,。在競爭法ELISA中則相反,,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同,,分述于下,。
(1) 間接法和夾心法
這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,,顯色清晰者為陽性,。但在ELSIA中,正常人血清反應后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照,。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6),。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標,。目視法簡捷明了,,但頗具主觀性。在條件許可下,,應該用比色計測定吸光值,,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,,S),、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,,然后進行計算,。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類,。
a. 陽性判定值
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,,試劑的制備必須標準化,,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,,并嚴格按規(guī)定操作,。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的?,F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml,。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),,兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效,。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,,則棄去,,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,,則該次實驗無效,。陽性判定值按下式計算:
陽性判定值=NCX+0.05 標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性,。應注意的是,,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,,而不是對各種試劑均可通用。
根據(jù)以上敘述可以看出,,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。
b.標本/陰性對照比值