詳細(xì)介紹
ELISA試劑盒?。牛蹋桑樱翙z測試劑盒?。牛蹋桑樱痢。耍桑?/p>
產(chǎn)品名稱:大鼠胰島素自身抗體
英文名稱:Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬,、犬、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD?。遥隆。桑拢?br />保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。
大鼠胰島素自身抗體 ELISA技術(shù)操作要點(diǎn),抗原和抗體
在ELISA實(shí)施過程中,,抗原和抗體的質(zhì)量是實(shí)驗(yàn)是否成功的關(guān)鍵因素,。本法要求所用抗原純度高,抗體效價高,、親和力強(qiáng),。
ELISA所用抗原有三個來源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原,。天然抗原取材于動物組織或體液,、微生物培養(yǎng)物等,一般含有多種抗原成分,,需經(jīng)純化,,提取出特定的抗原成分后才可應(yīng)用,,因此也稱提純抗原(purifiedantigen),。重組抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均為人工合成品,使用安全,,而且純度高,,干擾物質(zhì)少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術(shù)難度且要求較為昂貴的儀器設(shè)備和試劑,,其應(yīng)用仍十分普遍,,特別是對那些天然抗原不易得到的試驗(yàn),,更顯出其獨(dú)到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的,??寡宄煞謴?fù)雜,應(yīng)從中提取IgG才可用于包被固相或酶標(biāo)記,。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高,有時可適當(dāng)稀釋后直接進(jìn)行包被。制備酶結(jié)合物用的抗體的質(zhì)量往往要求有較高的純度,。經(jīng)硫酸銨鹽析純化的IgG可進(jìn)一步用各種分子篩層析提純,。也可用親和層析法提純特異性IgG,,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,,則效果更好,。
ELISA技術(shù)操作要點(diǎn),,酶和底物
ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高,、專一性強(qiáng),、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富,、價格不貴,、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力,。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶,。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,價格低廉,,有色產(chǎn)物易于測定,,光吸收高。ELISA中zui常用的酶為辣根過氧化酶(HRP)和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶(AP),。
HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,,純化方法也不復(fù)雜。它是一種糖蛋白,,含糖量約18%;分子量為44kD,;是一種復(fù)合酶,,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。主酶為無色糖蛋白,,在275nm波長處有zui高吸收峰,;輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán),在403nm波長處有zui高吸收峰,。