詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:小鼠apelin 12試劑盒
英文名稱:Mouse apelin 12,AP12 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測(cè)原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
實(shí)驗(yàn)方法:
酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
產(chǎn)品用途:科研ELISA檢測(cè)試劑盒.本公司可提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢和指導(dǎo),為客戶提供來樣檢測(cè)服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性,。
小鼠apelin 12試劑盒 洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗,。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),,以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來,。可以說在ELISA操作中,,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),,應(yīng)引起操作者的高度重視,操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,,不得馬虎,。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,,過程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液,;b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),;c.浸泡,,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,,間歇搖動(dòng),,浸泡時(shí)間不可隨意縮短;d.吸干孔內(nèi)液體,。吸干應(yīng)*,,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干,;e.重復(fù)操作c和d,,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,,可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間,。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液,。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),,其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,,從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),,從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,,高于0.2%時(shí),,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
(2)流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水,。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,,持續(xù)沖洗2分鐘后,,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,,吸干即可,。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,,其洗滌效果更為*,,且也簡(jiǎn)便、快速,。已有實(shí)驗(yàn)表明,,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,,讓水流沖擊板孔表面,,洗滌效果更佳。
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