詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱:小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒
英文名稱:Mouse thrombospondin 1,TSP-1 ELISA KIT
使用范圍:科研
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人,、大小鼠,、豚鼠、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全:血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國RD RB?。桑拢?br />保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,,用干冰或者冰袋低溫運輸。
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1試劑盒 加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,,加酶結(jié)合物,,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,,避免加在孔壁上部,,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡,。 加標(biāo)本一般用微量加樣器,,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,,以免發(fā)生交叉污染,,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣,。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和,。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成,。
保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,,在ELISA中似不恰當(dāng),。ELISA屬固相免疫測定,抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,,因此需經(jīng)擴散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育,。溫育常采用的溫度有43℃、37℃,、室溫和4℃(冰箱溫度)等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,,實驗表明,,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的生成可達(dá),。為加速反應(yīng),,可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗在43℃進(jìn)行,,但不宜采用更高的溫度,。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,,在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,,在ELISA中一般不予采用,。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,,可將ELISA板置于水浴箱中,,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡,。為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,,此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上,。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上,。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,,特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育,,反應(yīng)板均不宜疊放,,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),,操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),,標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育,。室溫溫育時,,ELISA板只要平置于操作臺上即可,。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點,,一個人操作時,,一次不宜多于兩塊板同時測定。
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