產(chǎn)品名稱：小鼠β-防御素試劑盒

英文名稱：Mouse β-Defensins,β-DF ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
保存條件：2-8℃
檢測方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
檢測范圍：詳見說明書 
主要作用：科研
待檢樣本：體液，血清,，血漿,，細胞培養(yǎng)上清液，尿液,，組織勻漿,心房水標(biāo)本等等,。
檢測目標(biāo)：人,，小鼠，大鼠,，豚鼠,，豬，犬,，兔,，牛，羊,，猴,，兔，馬等動物種屬,。

小鼠β-防御素試劑盒 結(jié)果判斷
定性測定
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,，分別用"陽性"、"陰性"表示,。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,，即用滴度來表示反應(yīng)的強度,，其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,，將標(biāo)本作一系列稀釋后進行試驗,，呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強弱,，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義,。 在間接法和夾心法ELSIA中,，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,，陰性孔呈色深于陽性孔,。兩類反應(yīng)的結(jié)果判斷方法不同，分述于下,。
（1） 間接法和夾心法
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷,。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性,。但在ELSIA中,，正常人血清反應(yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底,，此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,，因此實驗中必須加測陰性對照,。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物（見3.6）。在用肉眼判斷結(jié)果時,，更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo),。目視法簡捷明了，但頗具主觀性,。在條件許可下,，應(yīng)該用比色計測定吸光值，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù),。先讀出標(biāo)本（sample,，S）、陽性對照（P）,、和陰性對照（N）的吸光值,，然后進行計算。計算方法有多種,，大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類,。
a． 陽性判定值
陽性判定值（cut-off value）一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù)，以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標(biāo)準,。用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,，試劑的制備必須標(biāo)準化，陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,，須配用精密的儀器,，并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標(biāo)本的實驗檢測而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例,。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml,。每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照,。測得A值后，先計算陰性對照A值的平均數(shù)（NCX）和陽性對照A值的平均數(shù)（PCX）,，兩個平均數(shù)的差（P-N）必須大于一個特定的數(shù)值（例0.400）,，試驗才有效。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,，并≤1.5×NCX,，如其中之一超出此范圍，則棄去,，而已另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,，則該次實驗無效,。陽性判定值按下式計算：
陽性判定值=NCX+0.05 標(biāo)本A值＞陽性判定值的為陽性,，小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,，式中0.05為該試劑盒的常數(shù),，只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用,。
根據(jù)以上敘述可以看出,，在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用，試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果,。
b.標(biāo)本/陰性對照比值
在實驗條件（包括試劑）較難保證恒定的情況下,，這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的A值后,，計算S/N值,。也有寫作P/N的，這里的P不代表陽性（positive）,，而是病人（patient）的縮寫,，不應(yīng)誤解。為避免混淆,，更宜用S/N表示,。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性標(biāo)準,，現(xiàn)多為各種測定所沿用,。實際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清,。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多,。因此,，這類試
b. 抑制率法
抑制率表示標(biāo)本在競爭結(jié)合中標(biāo)本對陰性反應(yīng)顯色的抑制程度，按下式計算：抑制率（%）= （陰性對照A值-標(biāo)本A值）×100%/陰性對照A值.一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,，＜50%為陰性,。
定量測定
ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多,，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*,，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準品在相同的條件下制作標(biāo)準曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,，標(biāo)準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙,，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接,，所得曲線一般呈S形,，其頭、尾部曲線趨于平坦,，中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域,。
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