產(chǎn)品名稱：人熱休克因子1試劑盒
英文名稱：Human Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA KIT
種屬：人
使用范圍：科研
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標(biāo)本齊全：血清、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國ＲＤ?。遥隆,。桑拢?br />保存條件：2-8℃
有效期：６個月
運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。
人熱休克因子1試劑盒保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,，這一保溫過程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng),。ELISA屬固相免疫測定,，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn),。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃,、37℃,、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度,。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時，實驗表明,，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),，可提高反應(yīng)的溫度,，有些試驗在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度,?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,，以形成zui多的沉淀,。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予采用,。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中,，ELISA板底應(yīng)貼著水面,，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋,，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,，此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布,，zui后將ELISA板放在濕紗布上,。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此,。無論是水浴還是濕盒溫育,，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡,。室溫溫育的反應(yīng),，操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育,。室溫溫育時，ELISA板只要平置于操作臺上即可,。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確,。為保證這一點(diǎn)，一個人操作時,，一次不宜多于兩塊板同時測定,。
洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻也決定著實驗的成敗,。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來?？梢哉f在ELISA操作中,，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視,，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌,，不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,，過程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液,；b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后,，即甩去）,；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔,，放置1-2分鐘,，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短,；d.吸干孔內(nèi)液體,。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸,，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干,；e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規(guī)定）,。在間接法中如本底較高,，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法,。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液,。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),，也含親水基團(tuán),，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體,。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時,，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度,。
（2）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水,。洗滌時附接一特殊裝置,，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后,，吸干液體,，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可,。浸泡式猶如盆浴,，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*,，且也簡便,、快速,。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌,。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳,。
注：本產(chǎn)品僅供科研使用,，不提供臨床，了解詳情請：,，