產(chǎn)品名稱：人FMS樣酪氨酸激酶3試劑盒
英文名稱：Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA  KIT
種屬：人
使用范圍：科研
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠,、豚鼠,、兔子、豬,、犬,、牛、羊…
標(biāo)本齊全：血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿,、組織液、關(guān)節(jié)液,、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:ＲＤ,、ＲＢ、ＩＢＬ
保存條件：2-8℃
有效期：６個(gè)月
運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸,，用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸,。
人FMS樣酪氨酸激酶3試劑盒試劑器材
　　1.　試劑
　　（1）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
　　　　NaCO31.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　
    （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4•12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
　?。?）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清,、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用。
　?。?）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml,，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml。
　?。?）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml,。
　　（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　　（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　?。?）　抗原,、抗體和酶標(biāo)記抗體。
　?。?）　正常人血清和陽性對照血清,。
　　2.　器材:
　　（1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標(biāo)板）40孔或96孔,，ELISA檢測儀,，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭,，小毛巾,，洗滌瓶。
　?。?）　小燒杯,、玻璃棒、試管,、吸管和量筒等,。
　　（3）　4℃冰箱,，37℃孵育箱,。
人FMS樣酪氨酸激酶3試劑盒注意事項(xiàng)
　　1.　正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份,，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,，說明有非特異性反應(yīng),，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉,。
　　2.　在ELISA中,，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
　?。?）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被,，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
　?。?） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度,，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后,，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
　?。?）　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
　?。?）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用,，應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時(shí)間后,，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入,。
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