產品名稱：人基質金屬蛋白酶1試劑盒
英文名稱：Human Matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA  KIT
種屬：人
使用范圍：科研
產品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、牛,、羊…
標本齊全：血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液,、關節(jié)液,、胸腔溢液等…
經營品牌:ＲＤ、ＲＢ,、ＩＢＬ
保存條件：2-8℃
有效期：６個月
運輸條件：低溫運輸,，用干冰或者冰袋低溫運輸。
人基質金屬蛋白酶1試劑盒試劑器材
　　1.　試劑
　?。?）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
　　　　NaCO3　1.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　
    （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4•12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
　?。?）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用,。
　?。?）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml,。
　?。?）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml。
　?。?）　TMB（四甲基聯苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　?。?）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　　（8）　抗原,、抗體和酶標記抗體,。
　　（9）　正常人血清和陽性對照血清,。
　　2.　器材:
　?。?）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔,，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器,，塑料滴頭,，小毛巾，洗滌瓶,。
　?。?）　小燒杯、玻璃棒,、試管,、吸管和量筒等。
　?。?）　4℃冰箱,，37℃孵育箱。
人基質金屬蛋白酶1試劑盒注意事項
　　1.　正式試驗時,，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性,。有時本底較高,，說明有非特異性反應，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
　　2.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:
　?。?）　固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應,，觀察其顯色反應是否均一性,，據此判明其吸附性能是否良好。
　?。?） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1,、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml,。
　　（3）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
　?。?）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應,，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護,。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入,。
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