間充質(zhì)干細胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒

,成脂誘導(dǎo)液

貨號：YJ-MSCYD-004

價格： 1280.0

規(guī)格： 100ml    200ml

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為團隊精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒,，可增強間充質(zhì)干細胞向成脂細胞分化的能力,。

本產(chǎn)品僅用于科研用途，不可用于診斷,、治療,、臨床、家庭及其他用途,。

產(chǎn)品組成成分及保存

注意：

1.為保證產(chǎn)品的有效性,，請避免反復(fù)凍融,。

2.配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃,，有效期為2周，請根據(jù)實驗用量合理配制,。

產(chǎn)品使用說明

1. 成脂誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制

①室溫條件下融化各因子及血清,。各因子融化后，瞬時離心,，使溶液集中于離心管底部,。（注意：若因子或血清中有沉淀物，屬正?，F(xiàn)象,，無須過濾，避免成分丟失,。）

②根據(jù)實驗用量,，于無菌操作臺中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基，建議每次配制50mL,，配制比例見下表：

2. 成脂誘導(dǎo)分化實驗步驟

①建議取第3~5代,、純度達90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細胞,，將其消化下來,，離心收集，使用含10%FBS的完全培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度,，均勻鋪于培養(yǎng)瓶/板中,，置于37℃5%CO2，飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。（細胞接種詳情參考表二）

表二

②待細胞匯合度達80%~100%時,，即可進行誘導(dǎo)分化。

③小心吸棄細胞培養(yǎng)上清,，沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（注意：完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預(yù)熱,。）

④每2~3day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,。換液時，若細胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,，是由于細胞量較大,，培養(yǎng)基消耗較快導(dǎo)致的，請及時縮短換液周期,。（注意：完全培養(yǎng)基加入前需提前置于37℃預(yù)熱,。）

⑤細胞誘導(dǎo)3周后，即可進行油紅O染色鑒定,。

3. 油紅染色分析

①細胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,，小心吸棄細胞培養(yǎng)上清，1×PBS潤洗1~2次,。加入適量細胞固定液,，室溫固定30 min。（細胞固定液為4%中性甲醛溶液等,，體積參考表二）

②配制油紅O工作液：油紅O貯存液與蒸餾水按照3：2配制,，（例：油紅O貯存液3mL，蒸餾水2mL）,，混勻,。使用濾紙過濾，收集濾液,，即為油紅O工作液,。（注意：成脂細胞內(nèi)的油滴極易脫落，操作時須謹慎,。）

③細胞固定完成后,，吸棄細胞固定液，1×PBS潤洗2次,。沿孔壁緩慢加入適量油紅O工作液,，室溫染色30min,。（注意：油紅O工作液底部可能會有沉淀，吸取時盡量不要觸及底部,。若細胞染色后有沉淀,，PBS洗去即可。）

④吸出染色液,，PBS潤洗,，去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果,。細胞內(nèi)油滴著色,，呈紅色。（注意：油紅O工作液不可重復(fù)使用,，不建議回收,。）

從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),，協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年,，是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,，歡迎您與我們聯(lián)系,。

實驗技術(shù)服務(wù)：