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間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒
,成骨誘導(dǎo)液
貨號(hào):YJ-MSCYD-002
價(jià)格: 1780.0
規(guī)格: 200ml
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品為團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒,可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的能力,。
本產(chǎn)品僅用于科研用途,,不可用于診斷、治療,、臨床,、家庭及其他用途。
產(chǎn)品組成成分及保存
試劑名稱 | 體積 | 保存條件 | 有效期 |
地塞米松 | 20μL | -20℃ | 1 Year |
抗壞血酸 | 400μL | -20℃ | 1 Year |
β-甘油磷酸鈉 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
谷氨酰胺 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
雙抗 | 2mL | -20℃ | 1 Year |
胎牛血清 | 20mL | -20℃ | 1 Year |
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 200mL | 2-8℃ | 1 Year |
茜素紅染色液 | 5mL | RT(室溫) | 1 Year |
? 注意:
1.為保證產(chǎn)品的有效性,,請避免反復(fù)凍融,。
2.配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃,有效期為2周,,請根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量合理配制,。
產(chǎn)品使用說明
1. 成骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制
① 室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后,,瞬時(shí)離心,,使溶液集中于離心管底部。
(注意:若因子或血清中有沉淀物,,屬正?,F(xiàn)象,無須過濾,,避免成分丟失,。)
② 根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量,于無菌操作臺(tái)中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,,建議每次配制50mL,,配制比例見下表:
試劑成分 | 配制比例 | 50mL配制體系 |
地塞米松 | 0.01% | 5μL |
抗壞血酸 | 0.2% | 100μL |
β-甘油磷酸鈉 | 1% | 500μL |
谷氨酰胺 | 1% | 500μL |
雙抗 | 1% | 500μL |
胎牛血清 | 10% | 5mL |
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 補(bǔ)充至所需體積 | 補(bǔ)充至總體積為50mL |
2. 成骨誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟
①建議取第3~5代,、純度達(dá)90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞,,將其消化下來,,離心收集,使用間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度為1~5×105個(gè)cell/mL,,均勻鋪于6孔板中,,每孔2mL,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
(注意:此處細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例,,若為其它培養(yǎng)器皿,請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積,。)
②待細(xì)胞匯合度達(dá)80%~100%時(shí),,即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。
③小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,,每孔2mL,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
(注意:完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱,。)
③每2day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時(shí),,若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,,是由于細(xì)胞量較大,營養(yǎng)消耗較快導(dǎo)致的,,請及時(shí)調(diào)整為每日換液。
(注意:完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱,。)
④細(xì)胞誘導(dǎo)3周后,,即可進(jìn)行茜素紅染色鑒定。
3. 茜素紅染色分析
① 細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,,小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,,1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細(xì)胞固定液(4%中性甲醛溶液等),,室溫固定30 min,。
② 吸棄細(xì)胞固定液,1×PBS潤洗2次,。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液,,每孔1mL,室溫染色30min,。
(注意:染色液底部可能會(huì)有沉淀,,吸取時(shí)盡量不要觸及底部,。若細(xì)胞染色后有沉淀,1×PBS洗去即可,。)
③ 吸出染色液,,1×PBS潤洗,去掉浮色,。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果,,鈣鹽呈較深的橙紅色。
(注意:染色液可重復(fù)使用,,建議收集,。)
質(zhì)量控制
無菌檢測(細(xì)菌、真菌和支原體檢測)
pH測試
滲透壓檢測
內(nèi)毒素
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注意事項(xiàng)
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可,。
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