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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第15年

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ZJU-0430+luc人膽囊癌細(xì)胞+luc傳代/復(fù)蘇技巧

時(shí)間:2024/7/16閱讀:329
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ZJU-0430+luc人膽囊癌細(xì)胞+luc

,ZJU0430 luc

貨號(hào):YJ-0024a(STR(ZJU0430鑒定))

價(jià)格: 3200.0

規(guī)格: 1*10 6

細(xì)胞描述

細(xì)胞是從一名74歲男性胃膽囊癌患者組織中分離得到,,ZJU-0430的遷移,,侵襲和增殖能力遠(yuǎn)大于GBC-SD細(xì)胞,可用于膽囊癌(GBC)的發(fā)病機(jī)理和治療的臨床前研究,并可能有助于開發(fā)早期診斷工具以及潛在的靶向療法,。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因,。

細(xì)胞特性

1 來源:人,男性,,膽囊癌

2 形態(tài):上皮樣,,貼壁生長

3 含量:>1x106  細(xì)胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

細(xì)胞篩選

該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細(xì)胞,,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,,其Luc熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸減弱。若實(shí)驗(yàn)要求需要維持熒光強(qiáng)度,,可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選,。        

建議收到細(xì)胞后至少傳3代,凍存留種后再進(jìn)行篩選,。

初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時(shí),建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml,。若篩選過程中,,漂浮細(xì)胞大于60%,則停止篩選,,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),,至細(xì)胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選,。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細(xì)胞正常增殖,,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng),。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備:1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基(推薦:YJ-0002),,優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %P/S 1 %

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細(xì)胞處理:

1 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。

2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域,、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤色服務(wù),,協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間,、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,,歡迎您與我們聯(lián)系,。

 

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):

 


 


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