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MFC小鼠前胃癌細胞傳代/復蘇技巧

時間:2024/6/7閱讀:317
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MFC小鼠前胃癌細胞

Mouse Pre - gastric Cancer Cells ,MFC

貨號:YJ-m035(種屬鑒定)

價格: 1800.0

規(guī)格: 1*106

細胞特性

1 來源:小鼠胃癌

2 形態(tài):上皮細胞樣,,貼壁生長

3 含量:>1*106 細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mL,,T752-3mL),,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。 

3.輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

MFC小鼠前胃癌細胞.png

下面T25瓶為例,;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息,。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。

 

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