胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)

產(chǎn)品簡介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內(nèi)的腸肽 酶會活化該酶原,，形成胰蛋白酶,。胰蛋白酶的特點在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原，這種過程即自動催化,。胰蛋白酶在小腸工作,，它會將蛋白質(zhì)水解為肽，進而分解為氨基酸,，其適溫度約為 37℃,。Ø Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA,、少量酚紅等組成,，經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,，或者一些組織的消化,，通常室溫下 1～2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。

產(chǎn)品組成：Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃

自備材料：

1,、 PBS,、Hanks液或無血清培養(yǎng)液

2、 顯微鏡

3,、 離心機

操作步驟(僅供參考)：

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液,，用無菌 PBS,、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清,。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min,， 不同的細胞消化時間有所不同,。

③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮,，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化,；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液,。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗,。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,，未及吹打細胞,，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min,，沉淀細胞,，盡量

去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,，即可用于后續(xù)實驗,。

2、組織的消化

不同的組織需要消化的時間相差很大,，通常以消化后可以充分打散組織為宜,。

注意事項：

1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),，以免失效,。

2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,，要特別注意避免消化液被細菌污染,。

3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,，否則細胞鋪板后生長狀況會較差,。

4、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

有效期： 12 個月有效。

293T細胞培養(yǎng)說明書

小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤細胞（G422）培養(yǎng)說明書

Ramos 人Burkitt's淋巴瘤細胞