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實(shí)驗(yàn)代做
細(xì)胞及相關(guān)培養(yǎng)
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Ramos 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞

時間:2019/1/8閱讀:1628
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Ramos 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞

Catalogue No.: C446

Product Format: frozen

Culture Properties懸浮

Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

 

Components  

Item

Specifications

Cell

2 tubes (1X10  6次方 cells/tube)

Manual

1 copy

 

Operation steps for cell culture

  • 輕輕吹勻細(xì)胞,,收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min,,棄上清;
  • 用新的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,,均勻分為幾份,,接種到新的培養(yǎng)瓶中,并補(bǔ)加足量的*培養(yǎng)基,;

(懸浮細(xì)胞比較依賴細(xì)胞密度,,細(xì)胞傳代前及傳代后密度不宜過低,過低可能會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢或者死亡,。細(xì)胞傳代前培養(yǎng)基不能*變黃,,不然細(xì)胞狀態(tài)變差會導(dǎo)致傳代失敗,。傳代過程吹打細(xì)胞應(yīng)盡量輕柔,不應(yīng)吹出過多氣泡,。)

  • 將細(xì)胞放回37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。

傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

  • 凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)
  • 降溫步驟:4度10min,,-20度2h,,-80過夜后液氮保存。

Tips:

  • 細(xì)胞經(jīng)過運(yùn)輸后,,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞后死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,,900-1000rpm(約150g)離心3min,,棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞,,再900-1000rpm(約150g)離心3min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,,如果平時碎片比較少,,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,,建議PBS多洗次,。
  • 細(xì)胞生長不均時,可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代,。
  • 細(xì)胞生長緩慢時,,可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(高不超過20%),也可以根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài),,選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。
  • 不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,,20s-10min均有可能,,具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),,嚴(yán)禁消化到細(xì)胞*漂浮,。客戶消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡,、漂浮、生長緩慢,,不提供免費(fèi)售后服務(wù),。
  • 干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支,。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費(fèi)售后服務(wù),。
  • 細(xì)胞狀態(tài)正常時,,應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種,凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測凍存效果,。我方不對客戶凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé),,客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。

Notice:

      客戶收到細(xì)胞有任何疑問請及時致電我們,,細(xì)胞收到后1周內(nèi)沒有任何電話,,或其他形式回訪,默認(rèn)為細(xì)胞質(zhì)量沒問題,,之后出了任何問題不給予免費(fèi)售后,。細(xì)胞免費(fèi)售后只提供一次,若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費(fèi)補(bǔ)發(fā),,細(xì)胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外,。

 

 

 

人肺癌細(xì)胞(NCI-H292)培養(yǎng)說明書
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