葉綠素測定儀的試驗
閱讀:3330 發(fā)布時間:2018-4-28
葉綠素測定儀是托普儀器研發(fā)的用來測量葉綠素含量的儀器,,通常市面上面主要是TYS-A型,。TYS-A葉綠素測定儀測量時間快速,LCD直接顯示葉綠素值,,30個數(shù)據(jù),,自動計算并顯示平均值。
實驗準備
(一)材料:新鮮(或烘干)的植物葉片,。
(二)儀器設備:1. 分光光度計,;2. 電子ding載天平(感量0.01g);3. 研缽,;4. 棕色容量瓶,;5. 小漏斗;6. 定量濾紙,;7. 吸水紙,;8. 擦境紙;9. 滴管,。
(三)試劑:96%乙醇(或80%丙酮),;石英砂;碳酸鈣粉,。
實驗步驟
1. 取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),,混勻,。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,,分別放入研缽中,,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,,再加乙醇10ml,,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min,。3. 取濾紙1張,,置漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,,過濾到25ml棕色容量瓶中,,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次,,后連同殘渣一起倒入漏斗中,。4. 用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中,。直至濾紙和殘渣中無綠色為止,。后用乙醇定容至25ml,搖勻,。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi),。以95%乙醇為空白,在波長665nm,、649nm下測定吸光度,。
四、實驗結果計算:將測定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.9665-6.88A649,;Cb=24.96A649-7.32A665,。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),,二者之和為總葉綠素的濃度,。后根據(jù)下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:
葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重)。
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