葉綠素測(cè)定儀的試驗(yàn)
閱讀:3268 發(fā)布時(shí)間:2018-4-28
葉綠素測(cè)定儀是托普儀器研發(fā)的用來(lái)測(cè)量葉綠素含量的儀器,通常市面上面主要是TYS-A型,。TYS-A葉綠素測(cè)定儀測(cè)量時(shí)間快速,,LCD直接顯示葉綠素值,30個(gè)數(shù)據(jù),,自動(dòng)計(jì)算并顯示平均值,。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
(一)材料:新鮮(或烘干)的植物葉片。
(二)儀器設(shè)備:1. 分光光度計(jì),;2. 電子ding載天平(感量0.01g),;3. 研缽;4. 棕色容量瓶,;5. 小漏斗,;6. 定量濾紙;7. 吸水紙,;8. 擦境紙,;9. 滴管。
(三)試劑:96%乙醇(或80%丙酮),;石英砂,;碳酸鈣粉。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),,混勻,。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,,分別放入研缽中,,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,,再加乙醇10ml,,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min,。3. 取濾紙1張,,置漏斗中,用乙醇濕潤(rùn),,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,,過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽,、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,,后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?. 用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止,。后用乙醇定容至25ml,,搖勻。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi),。以95%乙醇為空白,,在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度,。
四,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算:將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.9665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665,。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca,、Cb:mg/L),二者之和為總?cè)~綠素的濃度,。后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量:
葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重),。
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