上海一基實業(yè)有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā),、招商代理的有限責任公司,,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準注冊的企業(yè),。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞,、血清,、抗體、生物試劑,、培養(yǎng)基,、等產(chǎn)品,具體請.
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本試劑盒只能用于科學研究,,不得用于醫(yī)學診斷。
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品,、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠組織多肽抗原(TPA)單克隆抗體透明酶標包被板中,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,,再加入酶標工作液,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,。依次加入底物A,、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,,顏色的深淺與樣品中大鼠組織多肽抗原(TPA)濃度呈正相關(guān),,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,,計算樣本中大鼠組織多肽抗原(TPA)含量,。 10、終止:取出酶標板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12,、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2,、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融,。
3、樣本應(yīng)充分離心,,不得有溶血及顆粒,。
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。
2、酶標包被板開封后如未用完,,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
3、建議所有的標準品,、樣本和空白對照都做雙份檢測,,取平均值,以減小實驗誤差,。
4,、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度,。
5、本試劑盒定量范圍為3.75-120 U/L,,超過此范圍,,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(3.75-120 U/L范圍內(nèi)),,乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
6,、若顯色過淺,,可適當延長底物溫育時間。
7,、為避免交叉污染,,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭,;酶標工作液,、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔,;不得重復使用封板膜,。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,,不同批號的試劑不得混用,。
9、底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
準備試劑,樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品,,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,,加入顯色液A,、B,37℃顯色15分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
計算
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒檢測范圍】
3.75 U/L - 120 U/L
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒貯藏】
2-8℃,,避光防潮保存,。
【大鼠組織多肽抗原(TPA)Elisa試劑盒有效期】
6個月