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上海一基實業(yè)有限公司

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生化試劑: 細胞試劑盒高純試劑標準品類氨基酸酶類蛋白質(zhì)類抗生素類植物激素及核酸類碳水化合物類色素類維生素類分離材料及耗材表面活性劑緩沖劑類培養(yǎng)基類測試盒類其他生化試劑

電熱套

分析檢測儀器: 分析檢測儀器

萬用可調(diào)電爐/封閉式電爐: 雙聯(lián)封閉電爐

混合器系列: 混合器

電阻爐系列: 電阻爐系列

蒸餾水器系列: 蒸餾水器

電熱板系列: 不銹鋼加熱平臺

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離心機系列: 臺式高速離心機

* 振蕩器系列: 旋渦混合器

培養(yǎng)箱系列: 智能培養(yǎng)箱

磁力攪拌器: 磁力攪拌器

超聲波清洗機: 超聲波清洗機超聲波細胞粉碎機

干燥箱: 紅外線快速干燥箱真空干燥箱

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器: 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A

糖度計,，折光儀: 糖度計，折光儀，折射儀

冷凍干燥機: 冷凍干燥機

層析冷柜: 雪花制冰機

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熱銷產(chǎn)品: 化學試劑

熱銷產(chǎn)品2

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大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）ELISA測試盒使用說明書

時間：2011/4/13閱讀：1976

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上海一基實業(yè)有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā)、招商代理的有限責任公司,，是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準注冊的企業(yè)。主要經(jīng)營ELISA試劑盒,、細胞,、血清、抗體,、生物試劑,、培養(yǎng)基、等產(chǎn)品,，具體請.
：,58610291,，60526762,
,

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷,。

大鼠總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）定量檢測試劑盒（ELISA）

使用說明書

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒試劑盒名稱】

大鼠總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）定量檢測試劑盒（ELISA）

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒試劑盒用途】

定量檢測大鼠血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）的含量。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒檢測原理】

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）,。將標準品,、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）單克隆抗體透明酶標包被板中,，溫育足夠時間后,，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標工作液,，溫育足夠時間后,，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A,、B,，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）濃度呈正相關(guān),，450nm波長下測定OD值,，根據(jù)標準品和樣品的OD值，計算樣本中大鼠總?cè)饧紫僭彼幔?/span>TT3）含量,。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒試劑盒組成】

1	酶標包被板	12孔×8條	7	顯色劑A液	6mL
2	標準品	0.3mL×6管	8	顯色劑B液	6mL
3	20倍濃縮洗滌液	25mL	9	終止液	6mL
4	樣本稀釋液	6mL	10	說明書	1份
5	特殊稀釋液	6mL	11	封板膜	2張
6	酶標試劑	6mL	12	密封袋	1個

備注：標準品（1號→6號）濃度依次為：240,、120、60,、30,、15、7.5 pmol/L.

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒需要而未提供的試劑和器材】

1,、37℃恒溫箱

2,、標準規(guī)格酶標儀

3、精密移液器及一次性吸頭

5,、一次性試管

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒操作步驟】

1,、準備：從冰箱取出試劑盒,，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2,、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。

3、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板,，固定于框架上,，分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,，記錄各孔位置,，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）,；空白對照孔不加。

4,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。

5、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

6,、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL,，空白對照孔不加。

7,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。

8、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）,。

9,、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL,，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s）,，37℃避光顯色15min。

10,、終止：取出酶標板,，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)（顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11,、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi),，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）,。

12、計算：根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,，計算出標準曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒樣本要求】

1,、樣本不能含疊氮鈉（NaN₃）,，因為疊氮鈉（NaN₃）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑,。

2,、標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能立即試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3,、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒,。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒注意事項】

1,、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,。

2,、酶標包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。

3,、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,，取平均值,，以減小實驗誤差。

4,、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,，計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

5,、本試劑盒定量范圍為7.5-240pmol/L,，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得,，不做為準確定量結(jié)果,，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果（7.5-240pmol/L范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度,。

6,、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間,。

7,、為避免交叉污染，標準品,、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭,；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,，要懸臂加樣,，不得碰到微孔,；不得重復(fù)使用封板膜。

8,、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,，不同批號的試劑不得混用。

9,、底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】

準備試劑,，樣品和標準品

加入準備好的樣品和標準品,，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次，加入酶標試劑,，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次,，加入顯色液A、B,，37℃顯色15分鐘

加入終止液

15分鐘之內(nèi)讀OD值

計算

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒檢測范圍】

7.5pmol/L - 240pmol/L

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒規(guī)格】

96人份/盒

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒貯藏】

2-8℃,，避光防潮保存。

【大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3）Elisa試劑盒有效期】

6個月



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