本產(chǎn)品僅用于科研,，不用于臨床

豬口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）使用說明書

【產(chǎn)品名稱】
通用名：豬口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus NSP （ELISA）
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒,、96T×2/盒
【預期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）引起的偶蹄動物的一種急性,、熱性,、高度接觸性傳染病,，其特征為口腔黏膜、蹄部,、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑,。
本試劑用于檢測豬血清中口蹄疫病毒非結構蛋白（NSP）抗體,，可用于口蹄疫野毒感染篩查和輔助診斷,。
【原    理】
    本試劑盒系由預包被口蹄疫病毒非結構蛋白重組抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,，應用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清,、血漿樣本中口蹄疫病毒非結構蛋白抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,，經(jīng)溫育后若樣品中含有口蹄疫病毒非結構蛋白抗體,，則將與酶標板上抗原結合，經(jīng)洗滌除去未結合的其他成分后,；再加入酶標記物,，與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合；再經(jīng)洗滌除去未結合的酶標記物,，在孔中加TMB底物液,，與酶反應形成藍色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關,；加入終止液終止反應后,，產(chǎn)物變?yōu)椋挥妹笜藘x在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,，即可知樣品是否含有口蹄疫病毒非結構蛋白抗體,。
【試劑盒組成】 

【儲存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期為12個月,。
包被板開封后請于2～8℃避光保存,，避免受潮。使用期限為2個月,。
【適用儀器】 含450nm,、630nm波長的酶標儀，37℃恒溫設備,，可調微量移液器,。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮,，無溶血,、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存,，長期需置-20℃保存,。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,，混勻）。陰,、陽性對照不用稀釋,。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,，設空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰,、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。
4.混勻,，置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次,，拍干,。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘,。
7.洗滌,，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,，混勻，37℃避光反應10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）,。
【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照≤0.10,，陽性對照≥1.0,。
【檢驗結果的解釋】
樣品A值≥0.38為陽性,；樣品A值＜0.38為陰性。
【試驗方法的局限性】
    該試驗僅用作定性篩查豬口蹄疫病毒非結構蛋白（NSP）抗體,，對本實驗結果陽性的樣本需結合臨床及其他檢測數(shù)據(jù)綜合分析,。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,，應避免接觸皮膚和衣物,，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,，使用時需恢復至室溫以*溶解,。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈,。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮,。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用,。