本產(chǎn)品僅用于科研,，不用于臨床

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）使用說明書

【產(chǎn)品名稱】
通用名：豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Circovirus 2 （ELISA）
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒,、96T×2/盒
【預期用途】 豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（Porcine Circovirus 2,，PCV2）引起的豬的一種多系統(tǒng)功能障礙性疾病，其臨床表現(xiàn)多種多樣,，主要為斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥、豬皮炎與綜合征,、母豬繁殖障礙等,。
本試劑用于檢測豬血清中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,，可用于豬圓環(huán)病毒Ⅱ型疫苗免疫效果評價。
【原    理】
    本試劑盒系由預包被豬圓環(huán)病毒Ⅱ型重組cap蛋白的酶標板,、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清,、血漿樣本中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體，則將與酶標板上抗原結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標記物,，與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),；加入終止液終止反應后,，產(chǎn)物變?yōu)?；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,。
【試劑盒組成】 

【儲存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期為12個月,。
包被板開封后請于2～8℃避光保存,，避免受潮,。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm,、630nm波長的酶標儀,，37℃恒溫設備,，可調(diào)微量移液器,。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮,，無溶血,、無污染,。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存,，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,，混勻）。陰,、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫,。
2.取所需用量酶標板條,，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰,、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。
4.混勻，置37℃反應30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，重復洗滌5次，拍干,。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘,。
7.洗滌，同步驟5,。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,，混勻，37℃避光反應10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
【參考值】 實驗正常的情況下,，陰性對照≤0.10，陽性對照≥0.6,。
【檢驗結(jié)果的解釋】
1.樣品A值≥0.38為陽性；樣品A值在0.2到0.38之間為可疑,；樣品A值＜0.2為陰性,。
2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足，建議補打相應疫苗,。
【試驗方法的局限性】
    該試驗僅作為定性檢測豬血清,、血漿中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強,、中,、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套,、穿工作衣,，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理,。
2.終止液具有腐蝕性,，應避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,，使用時需恢復至室溫以*溶解,。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈,。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮,。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用,。