小鼠ELISA試劑盒的整體概念,。接著分別從原理,、特點和使用方法三個方面進行說明,。在原理部分,，簡述了抗原 - 抗體特異性結合反應的過程,。特點方面突出了高靈敏度、特異性強,、操作簡便和穩(wěn)定性好等優(yōu)勢,。使用方法則按照一般的實驗流程，從樣本處理到最終測定進行了較為詳細的描述,。

     采用抗原 - 抗體特異性結合反應,。將已知的抗原或抗體固定在固相載體表面，加入待檢測的小鼠ELISA試劑盒樣本,，樣本中的目標分子與固相載體上的抗原或抗體結合,，再加入酶標記的二抗，通過酶催化底物產(chǎn)生顯色反應,，根據(jù)顏色的深淺來確定目標分子的含量,。

一、操作步驟：

1．使用前,，將所有小鼠ELISA試劑盒充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差,。

2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔。

3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時。

4．甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。

5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，小鼠ELISA試劑盒輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。

6．甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。

7.   每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照。

8．取出酶標板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應立即測定結果。

9．在450nm波長處測定各孔的OD值,。 需要而未提供的小鼠ELISA試劑盒和器材,。

二、特點：

高靈敏度：能夠檢測到微量的目標分子,。

特異性強：對特定的目標分子具有高度的選擇性,。

操作簡便：無需復雜的儀器設備，實驗步驟相對簡單,。

穩(wěn)定性好：小鼠ELISA試劑盒在一定的儲存條件下能夠保持較長時間的穩(wěn)定性,。

三、使用方法：

樣本處理：根據(jù)不同的目標分子,，對小鼠ELISA試劑盒樣本進行適當?shù)奶幚怼?/p>

加樣：將標準品和處理后的樣本加入到小鼠ELISA試劑盒的微孔板中,。

孵育：在特定的溫度和時間下進行孵育，使抗原 - 抗體充分結合,。

洗滌：去除未結合的物質(zhì),。

加酶標二抗：加入酶標記的二抗。

再次孵育和洗滌,。

顯色：加入底物,，產(chǎn)生顯色反應。

測定：使用酶標儀測定吸光度值,，計算目標分子的含量,。

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