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因此,在測定ELISA試劑盒樣的同時(shí),,繪制校準(zhǔn)曲線為理想,,否則應(yīng)在測定試樣的同時(shí),,平行測定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份,取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線上的相應(yīng)點(diǎn)核對,,其相對差值根據(jù)方法精密度不得大于5%~10%,,否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。
ELISA試劑盒校準(zhǔn)曲線的繪制: 用一系列被測物標(biāo)準(zhǔn)溶液,,按照標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟,,將被測物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤骸V苽浜玫臉?biāo)準(zhǔn)系列和空白,,在方法選定的波長下,,測定吸光度。已被測物濃度為橫坐標(biāo),,吸光度為縱坐標(biāo),,繪制校準(zhǔn)曲線。1)對標(biāo)準(zhǔn)系列,,溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測量后,,應(yīng)先作空白校正,然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;2)標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測定,,但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí),,應(yīng)和試樣同樣處理后再測定,。 3)校準(zhǔn)曲線的斜率常隨環(huán)境溫度,、試劑批號和貯存時(shí)間等實(shí)驗(yàn)條件的改變而變動。
凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線的分析方法,,都是在樣品測得信號值后,,從校準(zhǔn)曲線上查得其含量(或濃度)。因此,,繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線,,直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外,,ELISA試劑盒校準(zhǔn)曲線也確定了方法的測定范圍,。
【注意事項(xiàng)】
1、ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2,、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3,、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
4,、請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5,、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6,、底物請避光保存。
7,、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8、所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9、本試劑不同批號組分不得混用,。
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