上海研域生物ELISA試劑盒是一種敏感性高,，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷方法,。雖然ELISA試劑盒的操作步驟看似簡單易操作,，但如果我們在實驗的時候細節(jié)沒做到位的話就會直接影響實驗的效果。所以我們要注重ELISA試劑盒實驗時至關(guān)重要的步驟有哪些呢,？今天帶大家一起來了解下：

,、重要的洗滌：

不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的實驗結(jié)果,。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,，那么它會增加背景噪音。有必要的話,，可增加洗滌液中的鹽濃度,，這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高,，懷疑洗滌不夠時,，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

第二,、關(guān)鍵的封閉：

封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點,。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會。如果背景過高,，懷疑封閉不充分,，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間,。

目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑,。使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑,、吸附的抗原,、抗體和檢測試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,，但它不應(yīng)當與抗原,、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。

第三,、抗體濃度須優(yōu)化：

如果試劑稍有不同,，則可能需要優(yōu)化抗體的量,。非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點,，切勿使用過多的一抗或二抗,。

第四、檢測試劑要適量：

切勿使用過多的檢測試劑,。如果濃度過高,，或者未正確稀釋，則會導(dǎo)致高背景,。也不要顯色過度,，如有必要，優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液,。

只有確保每一步操作都做到位,，才會呈現(xiàn)理想的實驗結(jié)果。所以ELISA實驗的每一步都很重要,，我們在實驗的時候切記不可以掉以輕心,。