產(chǎn)品簡介:
姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)
姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成,。Giemsa 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青,、嗜酸性、嗜堿性顆粒,,著色清晰,,但是對胞核著色偏深, 核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用,。Giemsa Stain 以進口的姬姆薩色素,、甲醇為主要原料,含*襯染劑,,經(jīng)研磨配制而成,,能呈現(xiàn)出清晰的細胞染色效果,,經(jīng)常用于組織切片、血液和細胞涂片,、細菌,、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色,。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),,與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,,稱為嗜酸性物質(zhì),;細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結(jié)合,,染紫藍色,,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結(jié)合,,染淡紫色,,稱為中性物質(zhì)。
Giemsa Stain(1:9)由 10×儲存液和磷酸鹽緩沖液組成,,1:9 混合成工作液后
使用,;亦可以分開使用,即先用 Giemsa Stain 染色,,再經(jīng)磷酸鹽緩沖液處理,,亦可以得到
滿意的染色效果。
產(chǎn)品組成:
100ml 500ml
試劑(A): Giemsa Stain 儲存液(10×) 10ml 50ml RT 避 光
試劑(B): 磷酸鹽緩沖液 100ml 500ml RT
自備材料:
1,、 載玻片,、顯微鏡
2、 蒸餾水
3,、 甲醇
4,、 0.1~0.5%乙酸
操作步驟(僅供參考):
(一)一步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合,,即取1份 Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa 工作液,,為即用型試劑,,不易保存,即用即配,。
2,、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,,用甲醇固定 1~3min,。
3,、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加 Giemsa 工作液覆蓋涂片,,室溫滴染 15~ 30min,。
4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗,。
5,、干燥、鏡檢,。
染色結(jié)果:
嗜酸性顆粒 粉紅色
嗜堿性顆粒 紫藍色
中性顆粒 淡紫色
(二)兩步法涂片染色
1,、Giemsa 工作液的配制:
粉紅色紫藍色淡紫色按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合,即取1 份的 Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到 4 份的蒸餾水中充分混勻,,即為 Giemsa 工作液,。Giemsa 工作液為即用型試劑,不易保存,,即用即配,。
2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,,待涂片自然干燥后,,用甲醇固定 1~3min。
3,、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,,滴加適量 Giemsa 工作液覆蓋涂片,室溫滴染
10~15min,。
4,、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動載玻片,,室溫靜置 5~10min,。
5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗,。
6,、干燥、鏡檢,。
染色結(jié)果: 嗜酸性顆粒 粉紅色
嗜堿性顆粒 紫藍色
中性顆粒 淡紫色
(三)組織切片染色
1,、Giemsa 工作液的配制:
粉紅色紫藍色淡紫色按試劑(A):試劑(B) =1:9 混合,即取 1 份 Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到 9 份磷酸鹽緩沖液中充分混勻,,即為 Giemsa 工作液,。Giemsa 工作液為即用型試劑,不易保存,,即用即配,。
2,、新鮮組織立即置于 Regaud 固定液固定 2 天,期間應更換 1 次固定液,。
3,、3%重鉻酸鉀固定 1 天。
4,、流水沖洗 16 個小時或過夜,。
5、照常規(guī)脫水,、包埋,。
6、切片厚度約為 5μm,,常規(guī)脫蠟至水,。
7、蒸餾水清洗 2 次,,每次 1min,。
8、入含 Giemsa 工作液染缸,,浸染 18~24h,。
9、蒸餾水稍微清洗,。
10,、0.1~0.5%乙酸洗 1~2min。
11,、自來水稍沖洗,。
12、用無水乙醇迅速脫水 3 次,,每次 5~10s,。
13、二甲苯透明,,中性樹脂封固,。
染色結(jié)果:
細胞核 藍色至紫色
細胞質(zhì) 淡藍色
嗜鉻細胞胞質(zhì) 黃綠色
結(jié)締組織 淡紅色
注意事項:
1、血液涂片或骨髓涂片應厚薄均勻,,以免影響染色效果,。
2、涂片染色中 Giemsa 染色后,,請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。
3,、如果染色過深或過淺,,應調(diào)整染色時間或工作液濃度,。
4、涂片染色和組織切片染色中,,pH 值對染色有一定影響,,載玻片應清潔、無酸堿污染,,以免影響染色效果,。
5、染色液經(jīng)稀釋后液面應金屬光澤則表示染液有染色作用,,否則染色液可能失效,。
6、組織切片染色中,,染色后需用大量 0.1~0.5%乙酸急速沖洗,,避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。
7,、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 組織切片染色,,如有必要亦可用于細胞涂片,但其濃度應適量下調(diào),。0.5%乙酸分化切片時,,切片呈粉紅色即可終止。
8,、Giemsa 組織切片染色中,,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色,。
9,、涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結(jié)果,,可按 Giemsa Stain儲存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1 配制 Giemsa 工作液,,充分混勻,即為快速 Giemsa 染色工作液,,將染色液滴加于細胞涂片或組織切片上,,加熱染色,20~30s 后重新加染色液,,反復 5~10 次,,其余步驟同上。
10,、染色液可重復使用,,但不能多次重復,若有沉淀物應過濾后使用。
11,、Regaud 固定液: 按3%重鉻酸鉀: 甲醛=4:1 配制,,臨用前混勻,1~2 天后失效,。
有效期:24 個月有效,。