血磷濃度檢測試劑盒說明書

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,。

規(guī)格：100T/96S

測定意義：

血磷主要指血中的無機(jī)磷,， 以無機(jī)磷鹽的形式存在,。血漿中鈣,、磷濃度關(guān)系密切,，在以 mg/dL表 示時(shí),，二者的乘積(  [Ca] ×  [P] )為 30~40 ,。當(dāng)(  [Ca] ×  [P] )>40 ，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨 組織,；若(  [Ca] ×  [P] )<35 則妨礙骨的鈣化,，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用,。血鈣和血磷含量 的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣,、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到維生素 D3 ,、 甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié),。

測定原理：

去除血清中有機(jī)磷后，無機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,，被硫酸亞鐵還原后呈藍(lán)色,，在620nm 有光吸收；通過測定620nm吸光度，計(jì)算血液中磷含量,。

自備儀器和用品：

離心機(jī),、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板,、和蒸餾水。 試劑組成和配置：

試劑一：液體×1 瓶,，4℃保存,。

試劑二：液體×1 瓶，4℃保存,。

試劑三：粉劑×1 瓶,，4℃保存。  臨用前配制,，依次加入11mL蒸餾水充分溶解,，再加入試劑二，充

分混合,。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1 支,，1mmol/L無機(jī)磷，4℃保存,。

血磷濃度測定操作：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,，調(diào)節(jié)波長到620nm ，蒸餾水調(diào)零,。

2. 取出標(biāo)準(zhǔn)液,，室溫解凍。

3. 血清預(yù)處理： 吸取50μL血清,，加950μL試劑一,，混勻后室溫8000rpm ，離心10min ,，取上清液,，待 測。

4. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板,，依次加入50μL蒸餾水,，50μL試劑一，100μL試劑 三,，混勻后靜置10min ,，于620nm測定吸光度，記為A空白管,。

5. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量石英比色皿/96孔板,，依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液，50μL試劑一，100μL試劑 三,，混勻后靜置10min ,，于620nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管,。

6. 測定管：取微量石英比色皿/96孔板,，依次加入50μL上清液，50μL試劑一,，100μL試劑

三,，混勻后靜置10min ，于620nm測定吸光度,，記為A測定管,。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

血磷濃度計(jì)算：

血磷含量 ( mmol/dL) =[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]× 樣品稀釋倍數(shù) ×V 樣總=2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)液：1 mmol/L,；樣品稀釋倍數(shù)：  (50μL血清+950μL試劑一) ÷50μL血清=20,。

注意事項(xiàng)：

1 、 試劑三需臨用前配制,，如未用完,，4℃保存，最多可使用3天,；

本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用,！請(qǐng)勿用于臨床、診斷,、食品,、化妝品檢測等用途！

2 ,、 測定過程中,，應(yīng)盡量避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞中有機(jī)磷酯進(jìn)入血清后可被酶水解而使得血 清無機(jī)磷含量增高,。

3 ,、 最低檢出限為0. 1mmol/L,。

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