日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

當(dāng)前位置:首頁(yè)   >>   資料下載   >>   碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase ,,CA)試劑盒說(shuō)明書

碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase ,CA)試劑盒說(shuō)明書

時(shí)間:2023/10/11閱讀:681
分享:
  • 提供商

    上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
  • 資料大小

    122.2KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    35次
  • 資料類型

    PDF 文件
  • 瀏覽次數(shù)

    681次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase ,,CA)試劑盒說(shuō)明書

微量法 100 管/96 樣

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

碳酸酐酶(CarbonicAnhydrase ,,CA)是一種含鋅金屬酶,,迄今在哺乳動(dòng)物體內(nèi)已發(fā)現(xiàn)至少有  11種同工酶,它們的結(jié)構(gòu),、分布,、性質(zhì)各異, 多與各種上皮細(xì)胞泌H-和碳酸氫鹽有關(guān),,通  過(guò)催化CO2水化反應(yīng)及某些脂,、醛類水化反應(yīng), 參與多種離子交換 ,,維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),。 測(cè)定原理:

碳酸酐酶具有酯酶活性, 可催化乙酸對(duì)硝基苯酯反應(yīng)生成對(duì)硝基苯酚,, 通過(guò)檢測(cè) 405nm 處 吸光值上升速率反映碳酸酐酶活性,。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、 96 孔板,、研缽、冰和蒸餾水,。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 50mL×2 瓶,, 4℃保存;

試劑一:液體 20mL×1 瓶,, 4℃保存,;

試劑二: 粉劑×1 瓶, -20℃避光保存,; 臨用前加入 5mL 試劑三,,充分溶解待用, 用不完的 試劑繼續(xù)-20℃避光保存,。

試劑三:液體 6mL×1 瓶,, 4℃保存。

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

1,、細(xì)菌或細(xì)胞的處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量 (104 個(gè)): 提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),, 超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,超聲 3S,,間隔 10S,,重復(fù)

30 次) ;8000g ,,4℃離心 10min,,取上清, 置冰上待測(cè),。

2,、組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液) ,,冰浴中勻漿,。 8000g  ,4℃離心 10min,,取上清,, 置冰上待測(cè)。 測(cè)定步驟

1 ,、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 405nm。

2 ,、試劑一,、試劑二提前 25℃預(yù)熱 10min,。

3 、取 96 孔板,,依次加入 20μL 樣本上清,, 140μL 試劑一, 最后加入 40μL 試劑二,。立刻混 勻,, 測(cè)定 405nm 下 3min 處吸光值 A1  與 6min 處吸光值 A2 ,ΔA=A2-A1


CA 活力計(jì)算:

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 1.0424x + 0.001,,R2 = 0.9994,;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/mL), y 為吸光值,。

1,、按照蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 對(duì)硝基酚定義為一個(gè)酶活力單位。

CA 活性(nmol/min/mg prot)=(ΔA-0.001) ÷1.0424×V 樣÷(V 樣×Cpr)÷T×1000 =319.77×(ΔA-0.001) ÷Cpr

2,、按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol  對(duì)硝基酚定義為一個(gè)酶活力單位,。 CA 活性(nmol/min/g  鮮重)=(ΔA-0.001) ÷1.0424×V 樣÷(W ×V 樣÷V 樣總)÷T×1000



=319.77×(ΔA-0.001) ÷W

3、按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義: 每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol  對(duì)硝基酚定義為一個(gè)酶活力單位,。

CA 活性(nmol/min/104 cell)=(ΔA-0.001) ÷1.0424×V 樣÷(500 ×V 樣÷V 樣總)÷T×1000 =0.639×(ΔA-0.001)

V 樣: 加入樣本體積: 0.02mL,;V 樣總: 加入提取液體積, 1 mL,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,, mg/mL;W:樣本質(zhì)量,, g,;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù), 500 萬(wàn),; T:反應(yīng)時(shí)間, 3min,;1000,,μmol 到nmol 的換算系數(shù)。


2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域,、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù),,協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間,、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 



會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功,!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),,化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),,建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量,。

撥打電話
在線留言