日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

β-羥丁酸（β-HB）含量檢測試劑盒（WST法）說明書

可見分光光度法

貨號：BC5080

規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1,、 試劑二：臨用前取一支加入1.5mL蒸餾水,，充分溶解。用不完的試劑分裝后-20℃可保存3周,。避免反復(fù)凍融,。

2、 試劑三：臨用前取一支加入400μL蒸餾水（約40T）,，充分溶解,。用不完的試劑分裝后-20℃保存，可以保存2周,。避免反復(fù)凍融,。

3、 標(biāo)準(zhǔn)品：8mg 3-羥基丁酸鈉,。臨用前加入980μL蒸餾水,，充分溶解，即8mg/mL 3-羥基丁酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液,。4℃保存1個(gè)月,。

4、 工作液配制：臨用前根據(jù)試驗(yàn)所需量將試劑一,、試劑二,、試劑三按照850:40:10（共900μL,，1T的量）的比例配成工作液，充分混勻,，置于37℃保溫15min（此步驟不可省略）,，現(xiàn)用現(xiàn)配，工作液在4h內(nèi)用完,。

產(chǎn)品說明：

β-羥丁酸（β-HB）,，在嚴(yán)重酸中毒患者體內(nèi)，由于酸中毒使患者體內(nèi)NADH生成增加,，進(jìn)而促使β-羥丁酸與乙酰乙酸的比值自正常的2:1提高至16:1,。β-羥丁酸在檢測糖尿病酮癥酸中毒診斷、治療中有重要意義,，對糖尿病的早期診斷也有重要意義,。本試劑盒適用于血清、血漿,、尿液等樣本,。

在pH8.8和37℃條件下，β-HB在β-羥丁酸脫氫酶（HBDH）催化下脫氫生成乙酞乙酸,，同時(shí)NAD⁺被還原成NADH,；在1-mPMS作用下，WST-1可與NADH反應(yīng),，產(chǎn)生水溶性formazan,，在450nm下有特征吸收峰。通過檢測450nm下波長變化,，可計(jì)算出β-HB的含量,。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測,。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì),、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水,。

操作步驟：

一,、 適用樣本

血清、血漿,、尿液等樣本,，直接檢測即可，若溶液有渾濁可離心后進(jìn)行測定

二,、測定步驟

1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：將8mg/mL 3-羥基丁酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液,，用蒸餾水稀釋至0.125,、0.0625、0.03125,、0.015625,、0.0078125mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。

3,、 按下表步驟加樣：

三、β-HB含量計(jì)算

1,、 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以β-HB標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)（x,，mg/mL），以ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，得到線性回歸方程y=kx+b,，將ΔA測定帶入方程求得x（mg/mL）。

2,、 計(jì)算公式

（1）按照蛋白濃度計(jì)算

β-HB含量（μmol /mg prot）=x×V樣÷（V樣×Cpr）÷126.09×1000=7.931x÷Cpr

（2）按照血清（漿）體積計(jì)算

β-HB含量（μmol /mL）=x×V樣÷V樣÷126.09×1000=7.931x

V樣：反應(yīng)中加入樣本體積,，100 μL=0.1 mL；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL,；V樣總：加入提取液體積，1 mL,；126.09：β-羥基丁酸鈉分子量,，mg/mmol；1000：1mmol=1000μmol,。

注意事項(xiàng)：

1,、顯色完成后,，請?jiān)?/span>10 min之內(nèi)完成檢測。

2,、如果ΔA測定低于或超過標(biāo)準(zhǔn)曲線吸光值范圍,，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取100μL 牛血清按上述步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，用1mL玻璃比色皿測定后進(jìn)行計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.585- 0.057= 0.528,，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7905x+0.0221，的x=0.640,。計(jì)算

β-HB含量（μmol /mL）=7.931x=5.076 μmol /mL

相關(guān)系列產(chǎn)品：

BC0710/BC0715  α-酮戊二酸脫氫酶（α-KGDH）活性檢測試劑盒

BC2150/BC2155  檸檬酸（CA）含量檢測試劑盒

BC0950/BC0955  琥珀酸脫氫酶（SDH）活性檢測試劑盒

BC0380/BC0385  丙 酮酸脫氫酶（PDH）活性檢測試劑盒

BC2160/BC2165  線粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm）活性檢測試劑盒

β-羥丁酸含量檢測試劑盒 輔酶 β-羥丁酸含量檢測試劑盒 輔酶