硝酸還原酶（NR）檢測測試盒 氮代謝

產(chǎn)品名稱:：  硝酸還原酶(NR)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Nitrate Reductase（NR）Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0080       產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存,；            參考價格：300
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:  硝酸還原酶檢測試劑盒|NR檢測試劑盒|硝酸還原酶|試劑盒

簡要介紹：
NR廣泛存在于植物中,，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶，也是誘導(dǎo)酶,，對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響,。
   NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ+NADH+H＋→NO2ˉ+NAD＋+H2O ,；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,，與對氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物,；生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法測定,。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
誘導(dǎo)劑儲備液：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液：液體25mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：液體40mL×1瓶，-20℃保存,。
試劑二：液體10mL×1瓶,，-20℃保存。
試劑三：液體20mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存,。
標(biāo)準液：NaNO₂標(biāo)準儲備液1mL,，10μmol/mL，-20℃保存,。
誘導(dǎo)劑應(yīng)用液的配制：用時將誘導(dǎo)劑儲備液稀釋10倍,，即取10mL誘導(dǎo)劑儲備液加90mL蒸餾水，充分混勻,。
標(biāo)準液的配制：將標(biāo)準儲備液用蒸餾水稀釋為1.5,、1.0、0.8,、0.6,、0.4、0.2,、0.1μmol/mL 濃度的標(biāo)準溶液 ,。
產(chǎn)品說明：
NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶,，也是誘導(dǎo)酶,，對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,，NO₃ˉ+NADH+H^＋→ NO₂ˉ +NAD^＋+H₂O,；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對–氨基ben磺酸α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物,；生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰,，可用分光光度法測定。
需自備的儀器和用品:
    可見分光光度計,、水浴鍋,、臺式離心機,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
操作步驟：
一、樣品測定的前處理
1,、取適量誘導(dǎo)劑于燒杯中,，將新鮮標(biāo)本洗凈，濾紙吸干,，放入誘導(dǎo)劑應(yīng)用液中（淹沒即可）,，浸泡2h，取出樣本,，濾紙吸干后,，-20℃冷凍30min，取出樣本,，濾紙吸干,。（根據(jù)需要進行誘導(dǎo)處理）
2、稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液,，冰浴研磨，4000g,，4℃離心10min,，取上清置冰上待測。
二,、測定步驟
1,、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長540nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2、樣本測定（在EP管中加入下列試劑）

混勻后,，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴30min

   混勻,，顯色20min，4000g 常溫離心10min,，取上清，540nm下比色,，計算A測定-A對照,。
   注意：空白管只需測一次。
三,、NR活性計算：
1. 標(biāo)準曲線的繪制：
以標(biāo)準溶液濃度為x軸,，以ΔA（A標(biāo)準管-A空白管）為y軸繪制標(biāo)準曲線,，得到線性回歸方程y=kx+b。將（A測定-A對照）帶入方程中,，計算出x（μmol/mL）,。
2. NR活性的計算：
（1）按樣本鮮重計算：
單位定義：每小時每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol NO₂ˉ的量為一個 NR活力單位。
NR（U/g 鮮重）=x×V樣品÷(W÷V樣總×V樣品)÷T= 2x÷W,。
（2）按樣本蛋白濃度計算：
單位定義：每小時每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol NO₂ˉ的量為一個 NR活力單位,。
NR（U/mg prot）=x×V樣品÷（V樣品×Cpr）÷T=2x÷Cpr。
V樣品：吸取樣本體積,，0.1mL,；V樣總：加入提取液體積，1mL,；T：反應(yīng)時間,，0.5h；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本鮮重，g,。

相關(guān)文獻：
《FIP1 Plays an Important Role in Nitrate Signaling and Regulates CIPK8 and CIPK23 Expression in Arabidopsis》 作者:Chao Wang, Wenjing Zhang, Zehui Li, Zhen Li, Yingjun Bi, Nigel M. Crawford and Yong Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《The trehalose-6-phosphate synthase TPS5 negatively regulates ABA signaling in Arabidopsis thaliana》 作者:Lianfu Tian,Zijing Xie,Changqing Lu,Xiaohua Hao,Sha Wu,Yuan Huang,Dongping Li,Liangbi Chen 期刊:Plant Cell Rep. 影響因子:3.499 PMID:30963238

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