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植物α-淀粉酶(α-Amylase,,α-AL)試劑盒 說(shuō)明 技術(shù)文章

閱讀:3714      發(fā)布時(shí)間:2019-6-12
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當(dāng)前位置: 首頁(yè) > 生理生化試劑盒 > 常量分光光度計(jì)法 > 淀粉系列 > 植物α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒

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植物α-淀粉酶(α-Amylase,,α-AL)試劑盒

商品貨號(hào):QS3401
英文名稱:α-amylase Assay Kit
別名:植物α-淀粉酶(α-AL)活性檢測(cè)試劑盒
檢測(cè)方法:常量法

 

商品貨號(hào):商品品牌:規(guī)格基本售價(jià)選擇規(guī)格
QS3401-50管/24樣索橋生物50管/24樣¥250.00元 

 

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

 

測(cè)定意義:

淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,,生成葡萄糖,、麥芽糖、麥芽三糖,、糊精等還原糖,,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶,。

測(cè)定原理:

還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),。β-淀粉酶不耐熱,在70℃鈍化15min,,從而測(cè)定α-淀粉酶活性,。

 

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

貨號(hào):QS3401                規(guī)格:50 管/24 樣

 

植物 α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒說(shuō)明書(shū) 可見(jiàn)分光光度法

 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,,包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶,。α -淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作 用于淀粉中的 α -1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖,、麥芽糖,、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉 的粘度降低,,因此又稱為液化酶,。

測(cè)定原理:

還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。β -淀粉酶不耐熱,,在 70℃鈍化 15min,, 從而測(cè)定 α -淀粉酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

可見(jiàn)分光光度計(jì),、恒溫水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、玻璃比色皿,、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:25mL×1 瓶,,常溫保存,,若有黃色晶體析出,需 90℃加熱溶解后再用,;

試劑二:20mL×1 瓶,,4℃保存,若有沉淀析出,,需 70℃加熱溶解后再用,。

粗酶液提取:

組織:稱取 0.1~0.2g 樣本(建議稱取約 0.1g 樣本),,加 1 mL 蒸餾水勻漿,;將勻漿倒入離 心管中,在室溫下放置提取 15min,,每隔 5min 振蕩 1 次,,使其充分提取,;3000g,,25℃離心 10min, 吸取上清液并且加蒸餾水定容至 10 mL,,搖勻,,即為淀粉酶原液。

血清(漿):直接檢測(cè),。

操作步驟和加樣表(在 1.5mLEP 管中依次加入下列試劑):

1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 540 nm,,蒸餾水調(diào)零,。

2、 試劑一或試劑二 40℃預(yù)熱 10min

3、測(cè)定步驟 

試劑(μ L)  對(duì)照管測(cè)定管 
α -淀粉酶原液 250250
70℃水浴 15min 左右,,冷卻
蒸餾水250 
試劑二 250
在 40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫 5min
試劑一500500

   混勻,,95℃水浴 5min,冷卻,, 540nm 處讀取對(duì)照管和測(cè)定管吸光度,,計(jì)算 Δ A=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。

α-淀粉酶活性計(jì)算:

1,、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸曲線為 y=3.7215x -0.1778,; x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y 為吸光值,。

2,、α -淀粉酶活性

(1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=[(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣 總)÷T=1.075×(Δ A+0.1778)÷W

(2)按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位,。

α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr) ÷T=0.1075×(Δ A+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(漿)樣本中 α -淀粉酶活性計(jì)算

單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位,。

α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷V 樣÷T=0.1075×(Δ A+ 0.1778)

V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.5mL,;V 樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,,0.25 mL;V 樣總:提取 液總體積,,10 mL,; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,;T:反應(yīng)時(shí)間,,5min。

 

淀粉系列   價(jià)格 
QS3400 淀粉含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣260
MS3400 淀粉含量測(cè)試盒微量法100管/96樣500
QS3401α-淀粉酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣250
MS3401α-淀粉酶測(cè)試盒微量法100管/48樣480
QS3402β-淀粉酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣460
MS3402β-淀粉酶測(cè)試盒微量法100管/48樣900
QS3403-50ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣2300
QS3403-25ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒紫外分光光度法25管/24樣1600
MS3403ADPG焦磷酸化酶(AGP)測(cè)試盒微量法100管/96樣4400
QS3404-50可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3404-25可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3404可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法100管/96樣6000
QS3405-50結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3405-25結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3405結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測(cè)試盒微量法100管/96樣6000
QS3406淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣850
MS3406淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒微量法100管/48樣1600

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