抗平滑肌抗體SMA的檢測方法

    抗平滑肌抗體（smoothmuscleantibody，SMA）見于多種自身免疫病。鼠肝,、腎、人甲狀腺和血小板等組織與平滑肌的肌動球蛋白具有共同的抗原性。因此,，以純化的肌漿球蛋白為抗原可進行沉淀試驗、間接血凝試驗,、放射免疫測定和酶免疫技術(shù)以檢測SMA,。但目前常用的是以平滑肌為抗原基質(zhì)片的間接免疫熒光法，現(xiàn)介紹如下,。

    1．平滑肌組織冰凍切片  將大鼠處死,，剖腹取胃，切取一塊胃壁組織,，洗凈后立即冰凍,。用冷凍切片機切成4～6／1m，貼于清潔玻片上,，迅速用電風(fēng)扇吹干,。置干燥器內(nèi)4℃存放，可用1～2個月,。

    2．操作步驟

    （1）將待測血清用0．01mol／L,，pH7．4PBS作1：10稀釋，以正常人血清和已知SMA陽性血清同法稀釋作為對照,。

    （2）將稀釋血清滴加于底物片上,，室溫、濕盒內(nèi)反應(yīng)30rain,。

    （3）用PBS流洗除去多余血清后,，再于PBS中浸洗3次。分別為5min,、5min,、10rain（以下同）。

    （4）吹干后,，滴加zui適工作濃度的熒光素標記抗人IgC,。室溫、濕盒內(nèi)反應(yīng)30min后按上述方法洗滌,。

    （5）吹干后,，用無自發(fā)熒光的緩沖甘油封片，熒光顯微鏡檢查,。用鼠胃作底物片時,，在粘膜下肌層呈現(xiàn)熒光為陽性,。陽性時可將血清再進一步稀釋以測定抗體滴度。

    3．臨床意義  SMA主要見于自身免疫性（狼瘡樣）肝炎,，可用以同SLE鑒別,。原發(fā)性膽汁性肝硬化和慢性活動性肝炎時，此抗體檢出率也高,，但后者SMA效價甚低,。急性病毒性肝炎時SMA陽性率可達80％，多在發(fā)病第1周出現(xiàn),。正常人SMA為陰性,，中、老年人群中陽性率可達5%左右,。

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