抗心肌β1與M2受體自身抗體的檢測(cè)方法

    近年來(lái)，學(xué)者們相繼發(fā)現(xiàn)在擴(kuò)張型心肌病（DCM）患者血清中存在抗心肌pI與M2受體的自身抗體,。張麟等（1998）以心肌pl與M2受體細(xì)胞外第二環(huán)表位肽段的合成肽作為抗原,，用ELESA法檢測(cè)了中國(guó)人DCM血清中抗心肌p1與M2受體的自身抗體，并分析其臨床意義,，現(xiàn)介紹如下,。

    1．操作步驟  將心肌pI與M：兩種受體的氨基酸肽段溶解于100mmol／L的無(wú)水Na2C03溶液中（PH：11），配成濃度為5／／z／mL的抗原包被溶液,。于微量酶標(biāo)板每孔加50bL進(jìn)行包被,；4℃冰箱過(guò)夜，次日加50tze／mLPMT溶液封閉,，37~C水浴1h，用PBS—T緩沖液洗板3次,。將待檢血清從1：20-1：2560倍比稀釋,，每孔分別加入血清50ul，4~C冰箱過(guò)夜,，用PBS—T溶液洗孔三次,。每孔加入50gLl：500親和純化的生物素標(biāo)記羊記人IzC（H+L）抗體，37℃水浴1h,。用PBS—T溶液洗板3次,，每孔加人50／tLl：500的鏈霉親合素一HRP結(jié)合物，37~C水浴1h,，用PBS溶液洗孔3次,。每孔加50~tL 2．5mmol／L H20：與2mmol／LABTS（溶于檸檬酸緩沖液，pH二5）的混合液,，37~（2水浴30min后,，用酶標(biāo)儀以405nm波長(zhǎng)測(cè)光密度值（OD值）。

    2．判斷標(biāo)準(zhǔn)  以陽(yáng)性血清與陰性血清的OD值之比即P／N≥2．1為陽(yáng)性。以呈陽(yáng)性的血清zui高稀釋度作為該標(biāo)本的抗體滴度,。每一樣本均設(shè)雙孔同時(shí)測(cè)定,。

    3．臨床意義  DCM患者不僅存在抗心肌p1與M：受體的自身抗體，而且抗體滴度也明顯高于正常對(duì)照組,。因此,，在DCM患者中檢測(cè)此類自身抗體對(duì)診斷和治療有一定的臨床意義，長(zhǎng)期應(yīng)用b-受體阻滯劑可能對(duì)病情的轉(zhuǎn)歸有利,。

廈門慧嘉生物科技有限公司專業(yè)提供各品牌ELISA試劑盒
詳情請(qǐng)登入: http://www.biohj.com
http://www.biohj.com/product.aspx?cid=1 

查詢,，或    ：[email protected]