抗組蛋白抗體（AHA）測(cè)定

    組蛋白是一種與DNA結(jié)合的富含賴(lài)氨酸與精氨酸的堿性蛋白,，由H1、U2A、H2B、H3、H₄ 5個(gè)亞單位構(gòu)成,。藥物性紅斑狼瘡和SEE病人血清中有抗組蛋白抗體（antihistonic antibody，AHA）,，RA病人血清中也可測(cè)到AHA,。目前檢測(cè)AHA方法甚多，但以EHSA法和熒光抗體法較實(shí)用?，F(xiàn)介紹ELISA法檢測(cè)AHA,。

    1．試劑  組蛋白抗原：可購(gòu)買(mǎi)商品或從小牛胸腺中制備，并經(jīng)SDS-PAGE證實(shí)有5個(gè)亞單位,。

    2．操作步驟  以2．5ug／mL組蛋白抗原200~L包被聚苯乙烯微孔板,，置4℃ 20h后，棄去抗原包被液,，加入0．3％明膠溶液以阻斷未被抗原包被的部位,。次日加入待測(cè)血清200uL（稀釋成1：200），室溫孵育2h,，經(jīng)PBS-吐溫及PBS緩沖液洗滌后,，加入zui適工作濃度的HRP標(biāo)記的羊抗人IRC或羊抗人IgM各200mL，室溫孵育2h后,，分別以PBS-吐溫和PBS溶液沖洗各3次,，加入底物2，2’-連氮-雙[3—乙基苯并噻唑啉-6—磺酸鹽]（ABTS）200uL,，置室溫孵育2h后,，以410nm測(cè)定各孔吸光度（A）。A值大于正常值范圍定為陽(yáng)性。

    3．正常參考值與臨床意義  因檢測(cè)方法不同,，AHA的正常值范圍也各異,。應(yīng)在建立方法后，各自訂出正常值范圍,。如唐福林等（1990）采用上述ELISA法檢測(cè)AHA的A值X二0．324,，2S：0．219（正常值范圍0．105—0．543），A值大于0.543視為陽(yáng)性,。

    AHA在藥物性狼瘡病人中陽(yáng)性率達(dá)90％—100％,，且與Sm或RNP呈交叉反應(yīng)，而自發(fā)性SLE病人中陽(yáng)性率僅為20％—35％,，且大多出現(xiàn)在疾病活動(dòng)期,，抗體是H1、H3-H4組分,。以kG-AHA為主的SLE病人,，其心包炎,、腎炎,、關(guān)節(jié)炎發(fā)生率高于以IgM-AHA為主的SLE病人，因此IeC-AHA測(cè)定有助于臨床治療的監(jiān)測(cè),。BA病人的AHA陽(yáng)性率也較高（可達(dá)36％）,，以IgM-AHA為主，與AHA陰性者相比,，關(guān)節(jié)外表現(xiàn)更為突出,，可作為診斷時(shí)參考。

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