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標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),,檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的,。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄,。zui后計(jì)算濃度時(shí),,稀釋了“N"倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N",。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,,75 pg/ml,,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,,9 pg/ml,,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,,臨用前15分鐘內(nèi)配制,。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml,。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制,。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml,。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制,。
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