一,、目的和要求 

掌握比色法測(cè)定土壤*磷的方法,，了解土壤中磷素形態(tài)及其土壤供磷能力與土壤*磷的關(guān)系。掌握土壤*磷的浸提,，浸提液的處理,，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作，顯色,，比色,，計(jì)算。

二,、內(nèi)容與原理

酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,，A1—P的形態(tài)存在，利用氟離子在酸性溶液中絡(luò)合Fe³⁺和Al³⁺的能力,，可使這類(lèi)土壤中比較活性的磷酸鐵鋁鹽被陸續(xù)活化釋放,，同時(shí)由于H⁺的作用，也能溶解出部分活性較大的Ca—P,，然后用鉬銻抗比色法進(jìn)行測(cè)定,。

三、主要儀器及試劑配制

儀器：塑料杯，往復(fù)式振蕩機(jī),，分光光度計(jì)或光電比色計(jì)

試劑： 

（1）0.03molL^-1NH₄F—0.025 molL^-1HCl浸提劑

稱(chēng)取1.11克NH₄F溶于800毫升水中,，加1.0molL^-1HCl25毫升，然后稀釋至1升,，貯于塑料瓶中,，其它試劑同前法。

（2）鉬銻抗試劑

    稱(chēng)取酒石酸銻鉀（KSbOC₄H₄O₆）0.5克,，溶于100毫升水中,，制成5％的溶液。

另稱(chēng)取鉬酸銨20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸,，邊加邊攪動(dòng),，再將0.5％的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中，zui后加至1升,，充分搖勻,，貯于棕色瓶中，此為鉬銻混合液,。

    臨用前（當(dāng)天）稱(chēng)取1.5克左旋抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻混合液中,，混勻,。此即鉬銻抗試劑,。（有效期24小時(shí)，如貯于冰箱中,，則有效期較長(zhǎng),。）

    （3）磷標(biāo)準(zhǔn)溶液

稱(chēng)取0.439克KH₂PO₄（105℃烘2小時(shí)）溶于200毫升水中，加入5毫升濃H₂SO₄,，轉(zhuǎn)入1升量瓶中,，用水定容，此為100 mgkg^-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,，可較長(zhǎng)時(shí)間保存,。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg^-1磷標(biāo)準(zhǔn)液，此液不宜久存,。

四,、操作方法與實(shí)驗(yàn)步驟

1、稱(chēng)取通過(guò)1毫米篩孔的風(fēng)干土樣品5克（到0.01克）于150毫升塑料杯中,，加入0.03molL^-1NH₄F——    0.025 molL^-1HCl浸提劑50毫升,，在20—30℃條件下振蕩30分鐘，取出后立即用干燥漏斗和無(wú)磷濾紙過(guò)濾于塑料杯中,，同時(shí)作試劑空白試驗(yàn),。

    2、吸取濾液10—20毫升于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H₃BO₃,，再加入二硝基酚指示劑2滴,，用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測(cè)液呈微黃，用鉬銻抗試劑5毫升顯色,，并用蒸餾水定容,，搖勻，在室溫高于15℃的條件下放置30分鐘,，用紅色濾光片或660nm波長(zhǎng)的光進(jìn)行比色,，以空白溶液的透光率為100（即光密度為0），讀出測(cè)定液的光密度,，在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出顯色液的磷濃度（mgkg^-1）,。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備：

吸取含磷（P）5mgkg^-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液0,、1,、2、3,、4,、5、6毫升,，分別加入50毫升容量瓶中,，加入10毫升0.8M H₃BO₃，再加入二硝基酚指示劑2滴,，用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測(cè)液呈微黃,，再加入鉬銻抗顯色劑5毫升，搖勻,，定容即得0,、0.1、0.2,、0.3,、0.4、0.5,、0.6 mgkg^-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,，與待測(cè)溶液同時(shí)比色，讀取吸收值,，在方格座標(biāo)紙上以吸收值為縱座標(biāo),，磷mgkg^-1數(shù)為橫座標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。

五,、作業(yè)

根據(jù)以下公式計(jì)算土壤中*磷的含量

                      顯色液磷mgkg^-1數(shù)×顯色液體積×分取倍數(shù)

   土壤中*磷mgkg^-1＝—————————————————――――――――—————————

                                      烘干土重（克）

   顯色液磷mgkg^-1數(shù)：從工作曲線(xiàn)查得顯色液的磷mgkg^-1數(shù)

   顯色液體積：50毫升

          浸提液總體積（50毫升）

分取倍數(shù)＝————--------—————————

            吸取浸出液毫升數(shù)

六、參考指標(biāo)

        土壤*磷     　    mgkg^-1等級(jí)

         ＜3                 很低

         3—7                 低

         7—20                中等

          >20                 高