基本信息

細胞名稱 : moc1/moc2小鼠口腔鱗狀細胞癌

細胞品系 : C57BL/6 Cxcr3-/-

細胞來源 : 國外

細胞鑒定 : STR鑒定已通過

細胞形態(tài) : 淋巴母多角形細胞樣,貼壁+懸浮生長

細胞用途 : 僅供科研使用

注意事項

1. MOC1細胞活性特別高,，增值速度非?？欤唤ㄗh傳代密度太大,，而選擇稀一點重鋪,，等長滿80%左右傳代的時候，很難消化下來,，建議加入0.25%EDTA的進去后充分混勻所有細胞都接觸放置到培養(yǎng)箱進行消化,，時長大約是3-4分鐘左右后拿出來

2. 在培養(yǎng)器皿的側(cè)邊進行拍打幫助細胞脫落，拍打過程大約持續(xù)2分鐘左右才會脫落大部分細胞,，如果脫落比例還不是很多,，也可以重新放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化1-2分鐘后再次拿出來進行拍打脫落，等80-90%細胞都脫落后再終止消化,，離心重懸再重新鋪瓶,，分散均勻。

3. MOC2細胞貼壁性和常規(guī)細胞類似沒有特別牢固,。倍增周期也沒有MOC1快,。采用常規(guī)消化方法處理。

常溫發(fā)貨

收到后T25瓶消毒再放置培養(yǎng)箱靜置2-3小時后觀察密度和狀態(tài)拍照2-3張反饋給銷售,，密度達標(biāo)就可以傳代,。前期傳代比例1:2，等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成1個1ml凍存管,，另外一瓶繼續(xù)傳代,，反復(fù)凍存2-3只后才擴增做實驗，以防突發(fā)情況引起斷種,。

干冰發(fā)貨

常規(guī)細胞發(fā)貨凍存管2只,，復(fù)蘇1只，另外一只備用,，第一個復(fù)蘇不成功時嚴格按照廠家要求復(fù)蘇第二個,，均沒有復(fù)蘇成功的情況即時留存復(fù)蘇照片通知我們。

培 養(yǎng) 基 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML培養(yǎng)基：IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培養(yǎng)基+FBS10%(50ml）+2.5mg/500ml胰島素+20ug/500ml+2.5ug/500ml EGF+ P/S  1% 雙抗,，1%,。

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

細胞背景

口腔鱗狀細胞癌(OSCC)是頭頸癌的一個突出子集,，頭頸癌是六大常見癌癥。發(fā)生OSCC的主要危險因素是致癌物暴露,，將頭頸癌的這一亞群與人瘤病毒誘導(dǎo)的頭頸癌區(qū)分開來,。盡管在檢測、手術(shù),、和放療方面取得了進展,，但OSCC的預(yù)后幾十年來一直保持穩(wěn)定。此外,，在診斷時,，大約三分之二的OSCC患者患有局部晚期疾病，導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率增加。

貼壁細胞

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％(w / v）0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。

３. 輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培養(yǎng)皿中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。

4. 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

５. 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。

懸浮細胞

懸浮狀態(tài)下生長的細胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),，一般情況下細胞密度維持在1×10?~1×10?個/mL(不同細胞對密度要求不同）可以維持細胞的正常生長,。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min,，棄去上清,，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進行,。

生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，moc1/moc2小鼠口腔鱗狀細胞癌/雌性必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。