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常見細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1.細(xì)菌污染

細(xì)菌污染是實驗室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染,。常見的有革蘭氏陽性菌,，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,，其中又以白色葡萄球菌較常見,。

培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變,。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗,，圓脫落死亡,。

2.真菌污染

真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的一種，常見的真菌有煙曲霉,、黑曲菌,、孔子霉、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌,。

培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,，有的散在生長,，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,，有的呈鏈狀排列。

真菌污染后,，細(xì)胞生長變慢,，但后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。

3.支原體污染

支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨立生活的微生物,，小直徑0.2μm,，一般過濾除菌無法去除它，光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu),。開始不易發(fā)現(xiàn),，能在偏堿條件下生存，對有抗藥性,。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間,。

培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后，部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長增殖變慢,，部分細(xì)胞變圓,，從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化,，或略有變化,，若不及時處理，還會產(chǎn)生交叉污染,。

4.病毒污染

組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，如果沒有除去潛在的病毒，就會產(chǎn)生病毒污染,。目前,，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。

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