小鼠ELISA試劑盒以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā),，提高試驗(yàn)質(zhì)量,。以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在得到了廣泛的應(yīng)用,，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全,、花板等結(jié)果,。將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，

下面分析小鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,，并給出相應(yīng)的解決辦法

一,、選擇試劑

選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。

二、加樣

可能原因：

1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外,。

解決辦法：

1，標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后,，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后,，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi),。

2，加樣后及時(shí)放入孵箱,。

3,，加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

4,，如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,。

5,，ELISA試劑盒標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作,。

三,、 孵育

可能原因：

1，孵育時(shí)未貼封片或加蓋,，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),，吸附于孔壁，難于清洗che底;

2，孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,，難以清洗che底。

解決辦法：

1,，貼封片或加蓋;

2,，按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。

四,、洗板

可能原因：

1,，采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉,。

2,，采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足,，導(dǎo)致洗板不che底;洗板針堵塞,，抽吸不wan全;洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差,。

3,，反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

解決辦法：

1,，ELISA試劑盒保證洗液注滿各孔,，洗板針暢通，洗完板后zui hao在吸水紙(選擇干凈,、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;

2,，合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī),。

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