流式抗體的選擇：

1、流式抗體本身也是抗體,，所以選擇流式抗體一定要滿足抗體選擇基本的條件：目標蛋白特異性，反應種屬以及應用實驗,。

2,、流式抗體熒光標記的方式包括直接標記和間接標記兩種。在流式實驗過程中,，盡量減少實驗工序和過程,，以保證實驗的真實和準確性。因此在條件允許的范圍內(nèi),，建議盡量用直接標記的抗體進行實驗而不去做間接標記,。

3、流式抗體熒光標記的選擇：如果實驗中檢測單一指標：不同熒光標記在不同的儀器上強度不同,。FACS Calibur儀器為例：PE ＞APC ＞PE-Cy5 ＞PerCP ＞FITC ＞PerCP-Cy5.5,，通常來說，PE*,，適用于弱表達抗原,。FITC強度較弱，適用于強表達抗原,，使用范圍比較廣,。用戶需根據(jù)檢測的目標蛋白進行具體選擇。如果同時檢測多個指標：確認流式細胞儀能檢測多少個通道：流式抗體每個通道只能選擇1種熒光素,。各個通道之間的熒光素可以隨意搭配,。如：實驗者同時檢測三個指標，可以在圖1中綠色,、和紅色三個通道中各選一個適當?shù)臒晒馑貥擞?，F(xiàn)ITC、PE和PE-cy5,。切忌所有指標選擇同一個通道的熒光標記,，以防止熒光的重疊和相互干擾，影響后結(jié)果,。因此,，流式細胞儀的通道越多,，同一份樣本能同時做的表面/胞內(nèi)標志就越多。常用熒光標記包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等,。

流式抗體的選擇使用注意事項：

1、建議實驗細胞的數(shù)量和抗體的比例要適當,。細胞過量或抗體過量都可能使實驗結(jié)果受影響,，因此需要優(yōu)化試驗條件。注：不同的流式技術(shù)對抗體的需求量有較大差異,，例如傳統(tǒng)流式細胞術(shù)（采用鞘液流系統(tǒng)）需要1×106個細胞為起始上樣量,，抗體用量為10μl，而微流式細胞術(shù)則只需5×105個細胞,，抗體用量減少到5μl,。

2、 直標的流式抗體應該4℃避光保存,，不要冷凍,。