讓大部分ELISA實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問(wèn)題,，就是在ELISA實(shí)驗(yàn)后結(jié)果不理想。那碰到這種情況我們應(yīng)該怎么解決呢,？其實(shí)做科研實(shí)驗(yàn),，就是這樣在不斷探索中尋求真理。很難有人能*的實(shí)驗(yàn)成功,。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)那些千萬(wàn)不能忽視的一些小細(xì)節(jié),，還有我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)過(guò)程中能夠盡量避免一些誤區(qū)。我們來(lái)一起簡(jiǎn)單了解下影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的因素有哪些,，然后盡量在實(shí)驗(yàn)的時(shí)候避開(kāi)這些誤區(qū),。  

  1. 操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18 c～25℃),、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間,、洗滌的次數(shù)等,，要先查看水育箱溫度,，是否符合要求,。

    2. 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部,。加樣過(guò)程中避免液體外濺,，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈,，避免污染,，加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差,。

    3. 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù),，洗液在反應(yīng)孑l內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng),。不要使洗液在孑l間竄流，造成孔問(wèn)污染,，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性,。

    4. 要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),，造成顯色不統(tǒng)一,，判斷錯(cuò)誤。

    5. 顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強(qiáng),。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜,，忽視質(zhì)量保證,。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在使用時(shí)先平衡至室溫,，不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉使用,。試劑開(kāi)啟后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先檢查是否變質(zhì),，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,，導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。