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ELISA試劑盒標(biāo)本保存方法有哪些

時間:2021/11/4閱讀:2282
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ELISA試劑盒標(biāo)本保存方法有哪些呢?我們在ELISA試劑盒實驗中標(biāo)本是非常重要的,,經(jīng)常會出現(xiàn)ELISA操作員反映在標(biāo)本保存時出現(xiàn)溶血,、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,,上海研域生物特針對如何正確保存標(biāo)本問題做出總結(jié),。

一、標(biāo)本保存不當(dāng)

    在冰箱中保存過久的標(biāo)本,,血清中IgG可聚合成多聚體,、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深,、甚至造成假陽性,;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,,亦可出現(xiàn)假陰性,。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,;如不能立即測定,,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混合后再測定,,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩,。

ELISA實驗

二,、標(biāo)本溶血

    由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,,會導(dǎo)致非特異性顯色,ELISA試劑盒干擾測定結(jié)果,。為克服上述干擾作用,,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。

三,、標(biāo)本凝集不全

    在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固,。臨床檢驗工作中,,有時為了爭取時間快速檢測,,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,,血清中不再有纖維蛋白原存在,,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,,解決的辦法好是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>

四、標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響

    抗凝劑,、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用,。

五、標(biāo)本受細(xì)菌污染

    因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,。

做好了ELISA試劑盒因素和操作因素之后,,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性就容易的多了。

上海研域生物試劑盒提供代測,、全程指導(dǎo)服務(wù),,為您的實驗負(fù)責(zé)到底,!

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