免疫組化染色具體操作步驟介紹
（以美國ZYMED公司SP試劑盒為例）
1,、石蠟切片脫蠟至水,。
2,、3%H2O2室溫孵育5~10分鐘,，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
3,、蒸餾水沖洗,，PBS浸泡5分鐘，（如需采用抗原修復(fù),，可在此步后進行）,。
4、 5~10%正常山羊血清（PBS稀釋）封閉,，室溫孵育10分鐘,。傾去血清，勿洗,，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液,，37℃孵育1~2小時或4℃,。
5、PBS沖洗,，5分鐘×3次,。
6、滴加適當(dāng)比例稀釋的生物素標記二抗（1%BSA-PBS稀釋）,，37℃孵育10~30分鐘,；或滴加第二代生物素標記二抗工作液，37℃或室溫孵育10~30分鐘,。
7,、PBS沖洗，5分鐘×3次,。
8,、滴加適當(dāng)比例稀釋的辣根酶標記鏈霉卵白素（PBS稀釋）,，37℃孵育10~30分鐘,；或第二代辣根酶標記鏈霉卵白素工作液，37℃或室溫孵育10~30分鐘,。
9,、PBS沖洗，5分鐘×3次,。
10,、顯色劑顯色（DAB或AEC）。
11,、自來水充分沖洗,，復(fù)染，封片,。
12,、冰凍切片免疫組化染色步驟
13、冰凍切片4~8mm,室溫放置30分鐘后,，入4℃丙酮固定10分鐘,，PBS洗，5分鐘×3.用3%過氧化氫孵育5~10分鐘,，消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性,。PBS洗，5分鐘×2,。