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酶誘導(dǎo)是指細(xì)胞在底物影響下進(jìn)行特定酶合成量增加的作用。藥物代謝主要發(fā)生在肝臟和腸道,。其中肝臟代謝主要由位于肝細(xì)胞滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的細(xì)胞色素P450（Cytochrome P450,，CYP）催化，少部分由非CYP酶（如UGT酶）催化代謝,。據(jù)統(tǒng)計(jì),，臨床上超過(guò)90%的藥物由CYP450酶代謝。

PART.01    CYP450酶誘導(dǎo)機(jī)理及試驗(yàn)方法

現(xiàn)已證明CYP450酶表達(dá)受孕烷X受體 (PXR),、組成型雄烷受體 (CAR),、芳烴受體（AHR）等核受體調(diào)控。這3個(gè)核受體均為轉(zhuǎn)錄因子,，當(dāng)與配體結(jié)合激活后,，核受體會(huì)從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)入細(xì)胞核中。其中,，PXR和AhR分別與細(xì)胞核內(nèi)的視黃醛X受體（RXR）和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ARNT）形成異源二聚體,，進(jìn)而結(jié)合在相應(yīng)靶基因上（如CYP酶），調(diào)節(jié)CYP酶的表達(dá),。AhR參與CYP1A2的誘導(dǎo),；PXR主要參與CYP3A4的誘導(dǎo)，其次是2C亞家族,；CAR與PXR的誘導(dǎo)譜非常重疊,，此外有研究表明CAR還可以誘導(dǎo)CYP2B6。因此,，在藥物早研期間,，可只評(píng)估CYP1A2，CYP2B6 和 CYP3A4的誘導(dǎo)作用,。

由于CYP酶誘導(dǎo)的試驗(yàn)是從“轉(zhuǎn)錄”,、“翻譯”、“蛋白質(zhì)翻譯后修飾”直至成為活性CYP酶蛋白,，所以CYP酶試驗(yàn)系統(tǒng)必須是肝細(xì)胞而非其亞結(jié)構(gòu)如肝微粒體或肝S9,。隨后在CYP450酶誘導(dǎo)試驗(yàn)時(shí)，通常需要結(jié)合酶活性和mRNA兩個(gè)水平上的結(jié)果做結(jié)論,。當(dāng)僅做酶活性試驗(yàn)時(shí),，若藥物同時(shí)存在酶抑制現(xiàn)象時(shí)，可能會(huì)掩蓋誘導(dǎo)作用,；而測(cè)量mRNA水平則能更真實(shí)地反應(yīng)誘導(dǎo)源頭上的效應(yīng),，且更為敏感,，直觀地避免了酶活性檢測(cè)存在的問題。

鑒于此,，為滿足客戶精準(zhǔn)地了解其早研藥物的酶誘導(dǎo)作用,，IPHASE技術(shù)人員成功研發(fā)人CYP450酶誘導(dǎo)表達(dá)檢測(cè)試劑盒（SYBR法）！

PART.02    IPHASE產(chǎn)品

IPHASE作為創(chuàng)新藥體外研究生物試劑,，技術(shù)人員以SYBR染料法，采用ΔΔCT-定量PCR的方式檢測(cè)CYP1A2,、CYP2B6和CYP3A4這三個(gè)CYP酶基因經(jīng)奧美拉唑,、苯巴筆脫和利福平誘導(dǎo)后其mRNA水平的變化，發(fā)現(xiàn)其mRNA倍數(shù)變化均顯著增加,，滿足藥物相互作用指導(dǎo)原則,，說(shuō)明IPHASE人CYP450酶誘導(dǎo)mRNA水平檢測(cè)試劑盒（SYBR法）能夠滿足客戶在mRNA水平上進(jìn)行酶誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。

IPHASE人CYP450酶誘導(dǎo)mRNA水平檢測(cè)試劑盒（SYBR法）提供給客戶提供進(jìn)行qPCR試驗(yàn)的擴(kuò)增試劑,，CYP1A2,、CYP2B6和CYP3A4這三個(gè)CYP酶基因以及一個(gè)內(nèi)參基因GAPDH的特異性引物。經(jīng)驗(yàn)證,，IPHASE所提供的特異性引物擴(kuò)增效率高,，且熔解曲線無(wú)雜峰，滿足客戶的試驗(yàn)需求,。

圖1.CYP1A2引物擴(kuò)增效率圖

注：R2=98.4%,；Eff%=106.401%

（R2越接近100%擴(kuò)增效率越好；Eff擴(kuò)增效率越接近90%~110%越好,，下同）

圖2.CYP2B6引物擴(kuò)增效率圖

注：R2=98.5%,；Eff%=95.791%

圖3.CYP2B6熔解曲線圖

圖4.CYP3A4熔解曲線圖

圖5.內(nèi)參基因GADPH標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出了多領(lǐng)域,、多種類的科研試劑,，為藥物早期研發(fā)提供篩選工具，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料,、新方法和新手段,，為食品、藥品,、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,，望廣大科研工作者咨詢。

發(fā)    文    章    得     獎(jiǎng)    勵(lì)

凡使用本公司產(chǎn)品,，在國(guó)內(nèi)及國(guó)際刊物上發(fā)表論文（論文發(fā)表日起一年內(nèi)）,，并注明產(chǎn)品屬于匯智和源/IPHASE所有，即可申請(qǐng)獎(jiǎng)勵(lì),。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同,，給予不同金額獎(jiǎng)品：

非SCI論文及IF≤5分,，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元,；

8分＜IF≤10分 1000元,；

IF≥10分 2000元；

注：禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購(gòu)買抵用券,；

活動(dòng)多多,，禮品豐厚，快來(lái)參與吧,！

關(guān)    于    我    們

匯智和源,，致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌,，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”,。

• CYP450酶代謝表型研究試劑盒

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