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      種子發(fā)芽率是指在最適宜條件下,，在規(guī)定天數(shù)內(nèi),，發(fā)芽的種子占供試種子的百分?jǐn)?shù)。它是決定種子品質(zhì)和實(shí)用價(jià)值大小的主要依據(jù),，與播種時(shí)的用種量直接有關(guān),。但是常規(guī)方法（直接發(fā)芽）測(cè)定發(fā)芽率所需時(shí)間較長(zhǎng),，特別是有時(shí)為了應(yīng)急需要，沒(méi)有足夠的時(shí)間來(lái)測(cè)定發(fā)芽率,，遇到休眠種子也無(wú)法知道,。快速測(cè)定法則能在較短時(shí)間內(nèi)獲得結(jié)果,。

Ⅰ．氯化三苯四氮唑法（ TTC法）

原理

　　凡有生命活力的種子胚部,，在呼吸作用過(guò)程中都有氧化還原反應(yīng)，而無(wú)生命省略的種胚則無(wú)此反應(yīng),。當(dāng)TTC滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi),，并作為氫受體被脫氫輔酶（NADH2 或NADPH2 ）上的氫還原時(shí)，便由無(wú)色的TTC變?yōu)榧t色的三苯基甲（TTF）,。

儀器藥品

　　光照培養(yǎng)箱 　 燒杯

　　培養(yǎng)皿 　　　鑷子

　　刀片 　　　　天平

　　0.5% TTC溶液：稱取0.5g TTC放在燒杯中,，加入少許95%乙醇使其溶解，然后用蒸餾水稀釋至100ml,。溶液避光保存,，若變紅色，即不能再用,。

操作步驟

　　1．浸種

　　將待測(cè)種子在30─35℃溫水中浸種（大麥,、小麥、秈谷6─8小時(shí),，玉米5小時(shí)左右,，粳谷2小時(shí)），以增強(qiáng)種胚的呼吸強(qiáng)度,，使顯色迅速,。

　　2．顯色

　　取吸脹的種子200粒，有刀片沿種子胚的中心線縱切為二半,，將其中的一半置于2只培養(yǎng)皿中,，每皿100個(gè)半粒，加入適量的0.5% TTC,，以覆蓋種子為度,。然后置于30℃光照培養(yǎng)箱中0.5─1小時(shí)。觀察結(jié)果,，凡胚被染為紅色的是活種子,。

　　將另一半在沸水中煮5分鐘殺死胚，作同樣染色處理,，作為對(duì)照觀察,。

　　3．計(jì)算活種子的百分率，如果可能的話與實(shí)際發(fā)芽率作一比較，看是否相符,？

Ⅱ．溴麝香草酚藍(lán)法（ BTB法）

原理

　　凡活細(xì)胞必有呼吸作用,，吸收空氣中的O2 ，放出CO2 ,。CO2 溶于

增加,，可用溴麝香草酚藍(lán)（BTB）來(lái)測(cè)定酸度的改變。BTB的變色范圍為pH6.0─7.6,，酸性呈黃色，堿性呈藍(lán)色,，中間經(jīng)過(guò)綠色（變色點(diǎn)為pH7.1）,。色澤差異顯著，易于觀察,。

儀器藥品

　　光照培養(yǎng)箱　 天平

　　培養(yǎng)皿　　　 燒杯

　　鑷子 　　　　漏斗

　　濾紙　　　　 洋菜

　　0.1%BTB溶液：稱取BTB0.1g,，溶解于煮沸過(guò)的自來(lái)水中（配制指示劑的水應(yīng)為微堿性，使溶液呈藍(lán)色或藍(lán)綠色,，蒸餾水為微酸性不宜用）,，然后用濾紙濾去殘?jiān)V液若呈黃色,，可加數(shù)滴稀氨水,，使之變?yōu)樗{(lán)色或藍(lán)綠色。此液貯于棕色瓶中可長(zhǎng)期保存,。

　　1%BTB瓊脂凝膠：取0.1%BTB溶液100ml置于燒杯中,，將瓊脂剪碎后加入，用小火加熱并不斷攪拌,。待瓊脂溶解后,，趁熱倒在數(shù)個(gè)干潔的培養(yǎng)皿中，使成一均勻的薄層,，冷卻后備用,。

操作步驟

　　1．浸種

　　 同上述TTC法。

　　2．顯色

　　取吸脹的種子200粒,，整齊地埋于準(zhǔn)備好的瓊脂凝膠培養(yǎng)皿中,，種子平放，間隔距離至少1cm,。然后將培養(yǎng)皿置于30─35℃光照培養(yǎng)箱下培養(yǎng)2─4小時(shí),，在藍(lán)色背景下觀察，如種胚附近呈現(xiàn)較深黃色暈圈是活種子,，否則是死種子,。

　　用沸水殺死的種子作同樣處理，進(jìn)行對(duì)比觀察。

　　3．計(jì)數(shù)種胚附近出現(xiàn)黃色暈圈的活種子數(shù),，算出發(fā)芽率,。

Ⅲ ．紅墨染色法

原理

　　凡生活細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有選擇性吸收物質(zhì)的能力，而死的種胚細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失這種能力,，于是染料便能進(jìn)入死細(xì)胞而染色,。

儀器藥品

　　1．浸種

　　同上述TTC法。

　　2．染色

　　取已吸脹的種子200粒,，沿胚的中線切為兩半,，將一半置于培養(yǎng)皿中，加入5%紅墨水（以淹沒(méi)種子為度）,，染色10梍15分鐘（溫度高時(shí)間可短些）,。染色后倒去紅墨水，用水沖洗多次,，至沖洗液無(wú)色為止,。檢查種子死活，凡種胚不著色或著色很淺的為活種子,；凡種胚與胚乳著色程度相同的為死種子,。可用沸水殺死的種子作對(duì)照觀察,。

　　3．計(jì)數(shù)種胚不著色或著色淺的種子數(shù),，算出發(fā)芽率。

Ⅳ．紙上熒光法

原理

　　具有生活力的種子和已經(jīng)死亡的種子,，它們的種皮對(duì)物質(zhì)的透性是不同的,，而許多植物的種子中又都含有熒光物質(zhì)。利用對(duì)熒光物質(zhì)的不同透性來(lái)區(qū)分種子的死活,，方法簡(jiǎn)單,，特別是對(duì)十字花科植物的種子，尤為適用,。

儀器藥品

　　紫外熒光燈　　 培養(yǎng)皿

　　鑷子　　　　　 濾紙（無(wú)熒光）

操作步驟

　　1．將完整無(wú)損的種子（油菜,、白菜等十字花科植物的種子100粒，于25─30℃水中浸泡2─3小時(shí),。

　　2．把已吸脹的種子,，以3─5mm間隔整齊地排列在培養(yǎng)皿中的濕濾紙上，濾紙上水分不能過(guò)多,，以免熒光物質(zhì)流散彼此影響,。培養(yǎng)皿可以不必加蓋，放置1.5─2小時(shí),，取去種子,，將濾紙陰干,。取出的種子仍按原來(lái)順序排列在另一培養(yǎng)皿中（以備驗(yàn)證）。

　　3．將陰干的濾紙置于紫外熒光燈下進(jìn)行觀察,，觀察如能在暗室中進(jìn)行,，則效果更好。

　　4．在放過(guò)種子的位置上如見(jiàn)到熒光圈,，則為死種子,。如要確證它們是死種子，可將排列在另一培養(yǎng)皿中的這些種子揀出來(lái),，集中在一只培養(yǎng)皿的濕濾紙上,，而讓不產(chǎn)生熒光圈的種子留在培養(yǎng)皿中，維持濕度,，讓其自然發(fā)芽,。

　　5．3─4天后記錄培養(yǎng)皿中發(fā)芽種子數(shù)，填入下表中,。

　　此方法的成敗，首先決定于種子中熒光物質(zhì)的存在,，其次決定于種皮的性質(zhì),。有些種子無(wú)論有無(wú)發(fā)芽能力，一經(jīng)浸泡,，即有熒光物質(zhì)透出,，大豆即屬此類；

也有些種子由于種皮的不透性,，無(wú)論種子死活,，都不產(chǎn)生熒光圈，許多植物的種子都會(huì)碰到這種個(gè)別現(xiàn)象,，此時(shí)只有用機(jī)械方法擦傷種皮,，可重行驗(yàn)證。相反,，有時(shí)由于收獲時(shí)受潮,，種皮已破裂，也會(huì)產(chǎn)生熒光圈,，試驗(yàn)時(shí)都應(yīng)該注意,。最好將浸泡液進(jìn)行檢查，沒(méi)有熒光則適于作試驗(yàn)材料,。

• 微生物培養(yǎng)光照培養(yǎng)箱

  前處理設(shè)備在線詢價(jià)