產(chǎn)品分類：細(xì)胞培養(yǎng)

儲(chǔ)存條件  室溫,12個(gè)月

用途  可用于細(xì)胞培養(yǎng)和PCR等試驗(yàn)

注意事項(xiàng)  無菌超純水經(jīng)去離子處理后,經(jīng)微孔濾膜過濾,再經(jīng)高壓滅菌處理,不含細(xì)菌,幾乎不含金屬離子

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水,、純水洗凈,，烘干、冷卻,。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對(duì)于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

白介2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit通道蛋白5抗體包裝1g

白介29(IL-29)IL-29 ELISA Kitβ淀粉樣肽（1-40）抗體包裝5g

白介28A(IL-28A)IL-28A ELISA Kitβ淀粉樣肽（1-42）抗體包裝1g

白介28(IL-28)IL-28 ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝25g

白介27(IL－27)IL－27 ELISA Kitβ-抑制蛋白1抗體包裝5g

白介27(IL-27)IL-27 ELISA Kit錨定蛋白B抗體包裝500g

白介25(IL25/C19orf10)IL25/C19orf10 ELISA Kit銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體包裝1g

白介23(IL－23)IL－23 ELISA Kit單克/抗體包裝5g

白介23(IL-23)IL-23 ELISA KitASMTL蛋白抗體包裝10MG

白介22(IL-22)IL-22 ELISA Kit激受體相關(guān)蛋白16抗體包裝1g

白介2(IL－2)IL－2 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體包裝5g

白介2(IL-2)IL-2 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體包裝25g

白介1受體相關(guān)激1(IRAK1)IRAK1 ELISA Kitβ淀粉樣肽（31-35)/Aβ 31-35 抗體包裝100g

白介1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)IL1Ra/CD121 ELISA Kitβ淀粉樣肽 1-40（C端）抗體包裝25g

白介1受體拮抗劑(IL1Ra)IL1Ra ELISA Kitβ-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體包裝5g

膜粘連蛋白13抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)AG-18 inhibits EGFR with IC50 of 35 μM.
無菌超純水DHAV/FITC  鴨型肝炎A病IgG2,6-二氧苯 98%

DIO2/FITC  熒光標(biāo)記脫2IgG2,，5-二羥苯酯 98%

DISC1(CT)/FITC  熒光標(biāo)記DISC1 C端IgG5-氧水楊 98%

DISC1(NT)/FITC  熒光標(biāo)記DISC1 N端IgG6-氧水楊 98%

DJ-1/FITC  熒光標(biāo)記絲裂原依賴性癌因蛋白IgG羥纖維 USP級(jí)

DKK1/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白DKK1IgG羥纖維 3400～5000mpa.s,，25℃

DKK3/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白DKK3IgG羥纖維 250～450mpa.s，25℃

KMT6/EZH2/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白EZH2IgG羥纖維 00～1500mpa.s,，25℃