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PEG1000溶液

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PEG1000溶液滴定緩沖溶液

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué),、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒,、ELISA試劑盒、抗體,、重組蛋白,、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒,、熒光定量PCR檢測試劑盒,、細(xì)胞株、原代細(xì)胞,、細(xì)胞培養(yǎng)基,、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑,、abcam抗體,、R&D抗體、CST抗體,、ATCC細(xì)胞,、BD公司、GE公司,、賽默飛世爾公司產(chǎn)品,。


上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)

先后與天津中醫(yī)學(xué)院,、復(fù)旦大學(xué),、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué),、華東師范大學(xué),、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),,暨南大學(xué),,南京工業(yè)大學(xué),,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院,、瑞金醫(yī)院,、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系,。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿,、全血,、分泌物、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒,;另有針對各種動物(鼠,、兔、牛,、馬,、雞、豬,、狗,、山羊、猴,、魚)的科研試劑,。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾,、積極溝通,、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,,更專業(yè)的服務(wù),!

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,,一對一的客服服務(wù),,客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。








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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10ml
貨號 FS-R6387 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6387

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購,!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

PEG1000溶液

10ml

FS-R6387

產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,6個月

用途  聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,,可用作融合劑,以獲得單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞雜交

注意事項(xiàng)  無菌溶液,由DPBS(pH7.4)和PEG1000或稱聚乙二醇1000組成,經(jīng)無菌處理。體外培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞均可以做融合,,但成功概率較大的是單層貼壁細(xì)胞,。

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;

EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。

配制步驟:

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液,。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

opiorphin(opiorphin)opiorphin ELISA KitBTBD6蛋白抗體包裝5g

N-乙?;?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)AcSDKP ELISA KitBMP內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25g

N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)NAG ELISA Kit肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體包裝5g

N端前腦鈉(NT-proBNP)NT-proBNP ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體包裝1g

NANOG同源域蛋白(NANOG)NANOG ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體包裝5g

NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)SIRT1 ELISA Kit微管蛋白β輔助因子D抗體包裝25g

NADPH氧化1(NOX1)NOX1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體包裝5g

M型肌激(CKM)CKM ELISA Kit有絲分裂蛋白BUB3抗體包裝1g

MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)MAPKAPK2 ELISA Kitp60TRP蛋白抗體包裝5g

L選擇(L-Selectin/CD62L)L-Selectin/CD62L ELISA Kit博萊霉解抗體包裝1g

L-乳脫氫A鏈(LDH-A)LDH-A ELISA Kit短蛋白聚糖抗體包裝5g

L解(PAL)PAL ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝10MG

Klotho(Klotho)Klotho ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體包裝100g

KI-67抗原(MKI67)MKI67 ELISA Kit堿性亮鏈蛋白BZW1抗體包裝25g

I型膠原蛋白(COL-1)COL-1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體包裝5g

ASH1蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)CWHM-12是αV整聯(lián)蛋白的有效抑制劑,抑制αvβ8,,αvβ3,,αvβ6和αvβ1的 IC50 值分別為0.2,0.8,,1.5,,1.8 nM。
PEG1000溶液EAAT2/FITC  熒光標(biāo)記抗膠質(zhì)谷氨運(yùn)載蛋白2IgG三 GR,99.5%

EAAT3/FITC  熒光標(biāo)記抗膠質(zhì)谷氨運(yùn)載蛋白3IgG三 用于氨分析, ≥99.5% (GC)

EAG1/FITC   熒光標(biāo)記離子通道蛋白EAG1IgG三 LC-MS淋洗劑, ≥99.5% (GC)

EBNA-3/FITC  熒光標(biāo)記EB病核抗原-3IgG(R)-(-)-3--1,2- 97%

E-cadherin/FITC  熒光標(biāo)記E-鈣粘附分子IgG(S)-(+)-3--1,2-  97%

ECE1/FITC  熒光標(biāo)記內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1IgG(±)-環(huán)氧 96%

ECE2/FITC  熒光標(biāo)記抗內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2IgG氨比林 CP

ECG2/FITC  熒光標(biāo)記食道癌相關(guān)因IgG土霉  97%

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個濃度,。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量,。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

 




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