PEG1000溶液
- 公司名稱 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/7/4 11:44:32
- 訪問次數(shù) 359
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ml |
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貨號 | FS-R6387 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研 | 貨號 | FS-R6387 |
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
PEG1000溶液 | 10ml | FS-R6387 |
產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)
儲存條件 4℃,6個月
用途 聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,,可用作融合劑,以獲得單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞雜交
注意事項(xiàng) 無菌溶液,由DPBS(pH7.4)和PEG1000或稱聚乙二醇1000組成,經(jīng)無菌處理。體外培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞均可以做融合,,但成功概率較大的是單層貼壁細(xì)胞,。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
opiorphin(opiorphin)opiorphin ELISA KitBTBD6蛋白抗體包裝5g
N-乙?;?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)AcSDKP ELISA KitBMP內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25g
N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)NAG ELISA Kit肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體包裝5g
N端前腦鈉(NT-proBNP)NT-proBNP ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體包裝1g
NANOG同源域蛋白(NANOG)NANOG ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體包裝5g
NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)SIRT1 ELISA Kit微管蛋白β輔助因子D抗體包裝25g
NADPH氧化1(NOX1)NOX1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體包裝5g
M型肌激(CKM)CKM ELISA Kit有絲分裂蛋白BUB3抗體包裝1g
MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)MAPKAPK2 ELISA Kitp60TRP蛋白抗體包裝5g
L選擇(L-Selectin/CD62L)L-Selectin/CD62L ELISA Kit博萊霉解抗體包裝1g
L-乳脫氫A鏈(LDH-A)LDH-A ELISA Kit短蛋白聚糖抗體包裝5g
L解(PAL)PAL ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝10MG
Klotho(Klotho)Klotho ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體包裝100g
KI-67抗原(MKI67)MKI67 ELISA Kit堿性亮鏈蛋白BZW1抗體包裝25g
I型膠原蛋白(COL-1)COL-1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體包裝5g
ASH1蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)CWHM-12是αV整聯(lián)蛋白的有效抑制劑,抑制αvβ8,,αvβ3,,αvβ6和αvβ1的 IC50 值分別為0.2,0.8,,1.5,,1.8 nM。
PEG1000溶液EAAT2/FITC 熒光標(biāo)記抗膠質(zhì)谷氨運(yùn)載蛋白2IgG三 GR,99.5%
EAAT3/FITC 熒光標(biāo)記抗膠質(zhì)谷氨運(yùn)載蛋白3IgG三 用于氨分析, ≥99.5% (GC)
EAG1/FITC 熒光標(biāo)記離子通道蛋白EAG1IgG三 LC-MS淋洗劑, ≥99.5% (GC)
EBNA-3/FITC 熒光標(biāo)記EB病核抗原-3IgG(R)-(-)-3--1,2- 97%
E-cadherin/FITC 熒光標(biāo)記E-鈣粘附分子IgG(S)-(+)-3--1,2- 97%
ECE1/FITC 熒光標(biāo)記內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1IgG(±)-環(huán)氧 96%
ECE2/FITC 熒光標(biāo)記抗內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2IgG氨比林 CP
ECG2/FITC 熒光標(biāo)記食道癌相關(guān)因IgG土霉 97%
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。