試劑名稱：DRAQ5 遠紅外DNA熒光染料

儲存：-20℃干燥避光保存至少1年,，冰袋運輸,。

產(chǎn)地：西安強化生物

CAS NO：254098-36-7

分子式：C22H28N4O4

分子量：412.54

一、描述與基本特性：

DRAQ5 遠紅外DNA熒光染料,，具有細胞通透性,，適用于固定/非固定（活）細胞的染色，可與GFP,、FITC等熒光標記聯(lián)合使用,，無需RNase處理或熒光補償。

其優(yōu)勢在于無光漂白效應,，且熒光強度與核DNA含量成比例,。

光譜特性

參數(shù)：激發(fā)波長（Ex）

數(shù)值： 647 nm

參數(shù)：發(fā)射波長（Em）

數(shù)值：680nm

DRAQ5的發(fā)射波長與可見光區(qū)（如GFP和FITC）重疊較小，因此在多重熒光標記中具有良好的兼容性 ,。

DRAQ5的熒光強度與細胞中的DNA含量成正比,，且結(jié)合DNA時無顯著熒光增強,，使其在細胞周期分析和DNA定量中具有優(yōu)勢 ,。

二,、常見問題解答

【1】問：Draq5 儲液是否含 DMSO？

答：該品為水溶液形式,，不含 DMSO,。

【2】問：用 Draq5 對小鼠細胞進行2-3小時的活細胞成像。在對Draq5染色的細胞成像多久之后,，在細胞毒性產(chǎn)生并使細胞死亡之前可以停止成像,？

答：“Draq5 染色在 37°C 下加速，孵育時間（5-30 分鐘）可能會縮短”,，但這應該通過滴定和每種細胞類型進行分別測定,。

在未添加任何激動劑/拮抗劑之前，可以在 1μM 的檢測持續(xù)時間（通常為 0.5-3 小時）將 Draq5 添加到檢測培養(yǎng)基中,。

Draq5 染色發(fā)生快,，因此建議在分析前將 Draq5 添加到活細胞中。細胞的孵育時間不應超過 3 小時,，但可能會因細胞系而異,。

【3】問：使用 Draq5 對上皮癌細胞的細胞核進行染色，發(fā)現(xiàn)熒光隨著時間的推移變得越來越強,。這種影響在激光功率較高和受熱時發(fā)生強烈,。這可能是什么原因呢？

隨著時間的推移,，越來越多的染料與細胞核的 DNA 結(jié)合嗎,？

它是否僅在與核 DNA 反應時發(fā)出熒光？是否知道染料在細胞凋亡過程中的行為,。

當染料變少時,，染料能否與細胞核的DNA 結(jié)合得一樣好？

答：可以確認 Draq5 染色在較高溫度下增強,，因此可能需要調(diào)整孵育期,。孵育期越長，我們預期的信號就越多,，直到 DNA 飽和,。

如果 Draq5 隨后被清洗，我們預計染色會隨著時間的推移而緩慢下降,。

除非 Draq5 與 dsDNA 結(jié)合,，否則它幾乎不會發(fā)出熒光。只有當它嵌入 dsDNA 中時,，它才會產(chǎn)生強烈的熒光信號,。

Draq5 染色在細胞凋亡中不受影響，因為 Draq5 對dsDNA 的親和力在活細胞或死細胞中沒有差異,。

隨著細胞凋亡中 dsDNA 的數(shù)量發(fā)生變化,，Draq5 信號的強度也會隨著 dsDNA 的變化而變化,。

三、應用場景

【細胞核染色與DNA定量】

活細胞/固定細胞：穿透細胞膜標記細胞核,，區(qū)分有核/無核細胞,，分析染色體倍性及細胞周期（G1/S/G2期）。

多通路檢測：與GFP,、FITC等可見光區(qū)染料兼容,，替代Hoechst/DAPI等藍色探針，避免光譜重疊,。

【實驗平臺兼容性】

流式細胞術(shù)：488 nm激發(fā)時用685 LP二向鏡+710/50通道,；633 nm激發(fā)時用660/20通道。

顯微成像：激光共聚焦/CCD相機觀察,，推薦633/647 nm激發(fā),，發(fā)射濾片選695L/715LP/780 LP。

高內(nèi)涵篩選（HCS） ：自動化兼容,，無需洗滌步驟,。

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用于科研相關(guān)領(lǐng)域，不能用于人體實驗,！

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