CC96194 BL21感受態(tài)
- 公司名稱(chēng) 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 Nexell
- 型號(hào) CC96194
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/6/24 8:42:30
- 訪問(wèn)次數(shù) 11
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CC96194 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
BL21感受態(tài)
產(chǎn)品描述
BL21是*早開(kāi)發(fā)的用于原核表達(dá)的菌株,，BL21(DE3)、Rosetta,、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達(dá)菌株均來(lái)源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達(dá),，不含T7 RNA聚合酶,，所以不能用于由T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的蛋白表達(dá)(如：pET系列)；但含有大腸桿菌RNA聚合酶,，適合依賴(lài)于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如：pGEX,，pMAL質(zhì)粒)。其中ompT可減少外膜蛋白酶的表達(dá)量，從而減少重組蛋白的水解,，提高表達(dá)產(chǎn)量,；hsd基因變異可致菌株細(xì)胞內(nèi)的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失，從而提高PCR產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化效率,。BL21感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)107 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
? 高轉(zhuǎn)化效率：>1x107 cfu/µg pUC19 DNA
? 適合依賴(lài)于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)
產(chǎn)品組分
組分 | CC96194-01 | CC96194-02 |
BL21感受態(tài)細(xì)胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL |
基因型：E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
產(chǎn)品應(yīng)用
BL21感受態(tài)細(xì)胞適用于依賴(lài)于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如：pGEX，pMAL質(zhì)粒),。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 解凍感受態(tài)細(xì)胞：從-80 ℃取感受態(tài)細(xì)胞，放置在冰浴或冰水浴中融化,，約5-10 min,，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率。
2. DNA樣品的轉(zhuǎn)化：每100 μL感受態(tài)加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品(例如質(zhì)粒,、連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物等)約10 μL,，然后輕輕彈擊管底約2-3次，立即冰上靜置孵育30 min,。
? 加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品體積通常不宜超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的10%,。
? 加入待轉(zhuǎn)化DNA樣品后應(yīng)輕柔操作，避免使用移液槍吹打混勻,。
? 如果用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化擴(kuò)增,，冰浴靜置約10 min后可以直接涂板并培養(yǎng)過(guò)夜；如果用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化,，建議冰浴靜置30分鐘并嚴(yán)格執(zhí)行后續(xù)的熱激處理和復(fù)蘇培養(yǎng)等步驟,，以提高轉(zhuǎn)化效率,。
3. 熱激處理：將冰浴后的離心管快速置于42℃水浴中,，靜置熱激90 s。隨后立即轉(zhuǎn)移至冰水浴中靜置2-3 min以快速冷卻,。
? 熱激及轉(zhuǎn)移至冰浴過(guò)程中請(qǐng)勿晃動(dòng)離心管,。
4. 復(fù)蘇培養(yǎng)：加入900 μL 37℃預(yù)熱的LB或SOC培養(yǎng)基，顛倒數(shù)次混勻,，37℃搖床約220 rpm復(fù)蘇培養(yǎng)45 min,。
5. 收菌涂板：如果用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化擴(kuò)增，建議直接取50-100 μL進(jìn)行涂板即可；如果用于連接產(chǎn)物或重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化,，建議先5000 g,，1 min室溫離心沉淀細(xì)菌，吸除約900-950 μL上清,，然后用剩余的約50-100 μL菌液重懸,，涂布到含相應(yīng)抗生素的LB平板上。
6. 過(guò)夜培養(yǎng)：將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜,。
? 培養(yǎng)前需要將平板在超凈臺(tái)中稍微晾至無(wú)明顯水漬,，有利于形成單克隆。
保存條件
-80℃保存,；請(qǐng)勿將本品置于-20℃或者液氮中保存,。
相關(guān)參數(shù)
感受態(tài)類(lèi)型 | 化學(xué)感受態(tài) |
感受態(tài)菌株名稱(chēng) | BL21 |
種屬 | 大腸桿菌 |
轉(zhuǎn)化效率 | 高效率 (>1x10^7 cfu/µg pUC19 DNA) |
菌株用途 | 表達(dá) |
應(yīng)用特征 | 適用于依賴(lài)于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá) |
是否可進(jìn)行藍(lán)白斑篩選 | 否 |
菌株抗性 | - |
培養(yǎng)基 | LB |
培養(yǎng)條件 | 37℃，有氧 |
誘導(dǎo)方法 | - |
保存條件 | -80℃ |
運(yùn)輸條件 | 干冰 |
包裝規(guī)格 | 管裝 (100 µL/管) |
上海語(yǔ)純生物科技有限公司,，是由具有優(yōu)良生命科學(xué),、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè)。公司專(zhuān)注于原代細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品,，為高校、食品,、醫(yī)藥,、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù)。
公司自成立以來(lái)通過(guò)不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā),，已為客戶(hù)提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案，通過(guò)積極地探索,、研發(fā),、深化和豐富產(chǎn)品，目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類(lèi)多達(dá)200多種,，細(xì)胞系300多種,，原代細(xì)胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學(xué)技術(shù),，關(guān)愛(ài)公眾生命健康”為動(dòng)力,，通過(guò)技術(shù)創(chuàng)新，廣泛吸納高科技人才,，不斷完善產(chǎn)品體系,、豐富產(chǎn)品鏈，積極拓展市場(chǎng),，擴(kuò)充應(yīng)用領(lǐng)域,，,，建立了具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的“語(yǔ)純”品牌。
注意事項(xiàng)
1,、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套及口罩操作；
2,、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果,，請(qǐng)務(wù)必按照建議的儲(chǔ)存條件進(jìn)行保存；
3,、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。
BL21感受態(tài)
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