蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定全攻略：X射線、NMR,、冷凍電鏡對(duì)比檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中,，dànbáizhì結(jié)構(gòu)解析是理解其功能、設(shè)計(jì)靶向藥物和開發(fā)新型生物技術(shù)的基石,。三大主流結(jié)構(gòu)解析技術(shù)——X射線晶體學(xué),、核磁共振（NMR）和冷凍電鏡（cryo-EM）各具優(yōu)勢(shì)與局限。本文將從原理,、適用范圍,、數(shù)據(jù)質(zhì)量、樣品要求等方面系統(tǒng)比較,，助您選擇zuì適合的研究方案,。

一、X射線晶體學(xué)：高分辨率的黃金標(biāo)準(zhǔn)

※ 原理與優(yōu)勢(shì)

X射線晶體學(xué)通過(guò)衍射模式解析dànbáizhì晶體中原子排列，可達(dá)到亞埃級(jí)分辨率,。這一技術(shù)對(duì)dànbáizhì的三維結(jié)構(gòu)解析提供了jígāo的準(zhǔn)確性,，適用于大多數(shù)可結(jié)晶的蛋白及其復(fù)合物。它在藥物設(shè)計(jì)中尤為重要,，因?yàn)槟芮逦沂净钚晕稽c(diǎn)及配體結(jié)合模式,。

※ 局限性

其核心瓶頸在于樣品需結(jié)晶，這對(duì)大分子復(fù)合物,、膜蛋白和柔性區(qū)域蛋白尤為挑戰(zhàn),。此外，結(jié)晶條件的優(yōu)化耗時(shí)耗力,，且某些天然構(gòu)象在晶體中可能失真,。

二、核磁共振（NMR）：探索動(dòng)態(tài)與柔性

※ 原理與優(yōu)勢(shì)

NMR利用核自旋與磁場(chǎng)的相互作用,，在溶液中獲取dànbáizhì的結(jié)構(gòu)信息,。其優(yōu)勢(shì)在于：

• 能研究動(dòng)態(tài)變化、構(gòu)象柔性及分子間相互作用,；

• 適合研究小至中等分子量（通常<40 kDa）的蛋白,；

• 樣品保持在接近生理?xiàng)l件的溶液中。

※ 局限性

分子量較大的dànbáizhì信號(hào)復(fù)雜,，解析難度顯著增加,。此外，NMR測(cè)定時(shí)間較長(zhǎng),，數(shù)據(jù)分析復(fù)雜,，需要高濃度樣品。

三,、冷凍電鏡（Cryo-EM）：大分子復(fù)合物的利器

※ 原理與優(yōu)勢(shì)

冷凍電鏡直接觀察冷凍樣品中的分子,，通過(guò)大量單粒子圖像重建三維結(jié)構(gòu)。近年來(lái),，冷凍電鏡分辨率大幅提升,，已能與X射線晶體學(xué)媲美，特別適合解析大分子復(fù)合物,、膜蛋白和動(dòng)態(tài)組裝體,。其無(wú)需結(jié)晶，大幅拓寬了樣品范圍,。

※ 局限性

分辨率受限于樣品純度、均一性和冷凍制樣質(zhì)量,。對(duì)于小分子或柔性區(qū)域,，冷凍電鏡解析仍具挑戰(zhàn)。此外，儀器成本高昂,，對(duì)技術(shù)平臺(tái)及人員要求較高,。

四、結(jié)構(gòu)測(cè)定技術(shù)對(duì)比總結(jié)

五、技術(shù)選擇建議與發(fā)展趨勢(shì)

當(dāng)前,，選擇哪種結(jié)構(gòu)測(cè)定技術(shù)需綜合考慮dànbáizhì性質(zhì),、研究目標(biāo)和資源條件：

• 目標(biāo)是高分辨率靜態(tài)結(jié)構(gòu)？→→shǒuxuǎnX射線晶體學(xué),；

• 關(guān)注動(dòng)態(tài)與構(gòu)象多樣性,？→→NMR是理想方案；

• 解析復(fù)雜大分子,、膜蛋白,？→→冷凍電鏡顯示出wúkětìdài的優(yōu)勢(shì)。

未來(lái),，隨著單粒子冷凍電鏡的分辨率持續(xù)提高與自動(dòng)化發(fā)展,，其在結(jié)構(gòu)生物學(xué)中的主導(dǎo)地位愈發(fā)凸顯。NMR也在通過(guò)高場(chǎng)磁體,、標(biāo)記策略與計(jì)算方法增強(qiáng)對(duì)大分子和弱相互作用的解析能力,。而X射線晶體學(xué)則與冷凍電鏡相輔相成，結(jié)合晶體衍射和電鏡數(shù)據(jù),，推動(dòng)混合解析策略（hybrid methods）的發(fā)展,。

百泰派克生物科技致力于提供高質(zhì)量的dànbáizhì結(jié)構(gòu)鑒定服務(wù)，我們不僅搭建了高通量蛋白表達(dá)與純化平臺(tái),，更整合了先進(jìn)的冷凍電鏡和X射線系統(tǒng),，聯(lián)合NMR技術(shù)，構(gòu)建quánfāngwèi蛋白結(jié)構(gòu)測(cè)定解決方案,。無(wú)論是藥物靶點(diǎn)結(jié)構(gòu)解析,、功能域構(gòu)象研究還是動(dòng)態(tài)復(fù)合物重建，我們都能為您的科研與創(chuàng)新項(xiàng)目提供zhuānyè支持,。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一,、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù),。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題,。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白,。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷,、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別,。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì,、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù),。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA,、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā),、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù),；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué)、代謝組學(xué),、生物藥物表征,、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定全攻略：X射線,、NMR,、冷凍電鏡對(duì)比檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹